Связывание лектинов с мембранами эритроцитов выявляет целый ряд изменений в их молекулярной организации и функциях, позволяющие использовать лектины, как своеобразные структурные и функциональные зонды [2]. Как функциональные зонды, лектины дают информацию о подвижности мембранных рецепторов и функции примембранных сократительных структур. Как структурные зонды, лектины предоставляют возможность выявить биохимическую природу углеводных детерминант наружной поверхности клеточной мембраны и их распределении на поверхности клетки [5]. Созревание клеток, циркулирующих в кровяном русле, сопровождается маскированием D–галактозильных остатков поверхностных гликоконъюгатов. Эти процессы существенно страдают при патологии клеточных мембран эритроцитов [3].
Нами был проведен анализ структурно-функционального состояния красных кровяных телец при использовании биологических свойств растительных лектинов с установленной углеводной специфичностью, которая позволила применить их в качестве детекторов определённых углеводных групп на поверхности цитомембран.
Исследование проводилось 40 детям с хроническим неспецифическим энтеритом в возрасте от 1 до 14 лет, из числа которых у 18 морфологически был подтвержден поверхностный процесс в слизистой оболочке тонкой кишки, у 11 ¾ парциальная и у 11 ¾ субтотальная ворсинчатая атрофия. По характеру гистоморфологических изменений больные были разделены на три группы. Контролем явились цитолизограммы 28 здоровых детей.
Анализ стабильности мембран эритроцитов проводился методом кислотных эритрограмм [1] после инкубирования крови больного ребенка с лектинами: зародышей пшеницы (WGA) в концентрации 8 мкг/мл, конканавалина А (ConA) ¾ 125 мкг/мл, сои (SBA) ¾ 125 мкг/мл. Затем эритроциты использовали для получения эритрограмм и изучения действия лектинов на гемолитическую стойкость эритроцитов на основании изменения распределения эритроцитов по стойкости.
Параллельно методом кислотных эритрограмм проводили анализ эритроцитарной взвеси здорового донора до инкубации с лектином и после инкубации. Анализ данного исследования осуществляли на основании сравнения показателей оптической плотности эритроцитарной взвеси, полученной от больного, с показателями оптической плотности эритроцитарной взвеси здорового донора до и после инкубации проб с лектинами.
В ходе проведенных исследований показано, что после инкубации эритроцитов здоровых детей с лектинами, достоверно значимых показателей изменения гемолитического процесса не выявлено (p>0,05).
У больных с хроническим неспецифическим энтеритом, “мишенью” для лектинов являлись клетки с низкой устойчивостью к действию гемолитического агента и функционально полноценные эритроциты, при взаимодействии с которыми лектины выявляли тенденцию к нарастанию количества первых и уменьшению количества последних в сосудистом русле. Уменьшалось и время 100% гемолиза. Посредством лектинов подобные процессы выявлены во всех трёх исследуемых группах.
Связывание выбранного нами набора лектинов с повышенностойкими эритроцитами в различных группах проходило отлично. Взаимодействие маннозоспецифичного лектина конканавалина А (ConA) с эритроцитами с повышенной устойчивостью к действию гемолитического агента, и выявленное достоверное уменьшение их количества (p<0,05), наблюдалось в группе больных с поверхностными процессами в слизистой оболочке тонкой кишки.
Анализ результатов инкубирования эритроцитов обследованных больных с лектином WGA (лектин завязей пшеницы), выявил достоверное (p<0,05) уменьшение эритроцитов с повышенной стойкостью по сравнению с группой контроля в группе больных с парциальной ворсинчатой атрофией. Связывание лектина сои (SBA) с эритроцитами повышенной стойкости отмечалось только у больных детей с выраженной субтотальной ворсинчатой атрофией.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.