ПРИЛОЖЕН И Е 3.
ОСНОВЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА
Требования, предъявляемые к набору и стабилизации крови
Правильное выполнение лабораторных тестов и интерпретация их результатов возможны при соблюдении следующих обязательных условий:
а) малотравматичного набора крови; б) использования в качестве стабилизатора цитрата натрия, а не оксалата натрия, который образует с кальцием нерастворимые соединения, ускоряет агрегацию тромбоцитов, снижает активность факторов V и VIII; в) сохранения постоянной концентрации стабилизатора в плазме в зависимости от гематок-ритного показателя; г) силиконирования лабораторной посуды, в которую производится набор материала.
Венозную кровь получают малотравматичной пункцией (обычно локтевой вены), которую производят, по возможности, без наложения жгута. Кровь берется самотеком, без использования шприца (так как под воздействием отрицательного давления шприце-вого поршня происходит гемолиз эритроцитов, который значительно искажает гемоста-зиологические показатели). Первые несколько капель сливаются из-за высокого содержания в них тканевого тромбопластина, а последующие порции набираются в силикониро-ванную пробирку со стабилизатором-антикоагулянтом и немедленно перемешиваются. В качестве стабилизатора крови используется 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении к крови 1:9. Лабораторная посуда, в которую производится набор крови, для смягчения активации факторов контакта гемокоагуляции, силиконируется 5% раствором дихлорме-тилксилана в хлороформе.
Особенностью лабораторного исследования агрегационной функции тромбоцитов является соблюдение временных параметров исследования: богатая тромбоцитами плазма (БТП) исследуется не позднее 30-40 мин. после забора крови. БТП получается путем центрифугирования крови, стабилизированной 3,9% р-ом цитрата натрия из расчета 1:9 при 1500 об/мин, в течении 5-7мин.(БТП замораживанию не подлежит) , обедненная тромбоцитами плазма (ОТП) приготавливается центрифугированием БТП при 3500 об/мин, в течении 15-20 мин.
Любой тест исследования гемостаза должен одновременно контролироваться на плазме здоровых доноров для сопоставления полученных результатов и интерпретации лабораторных параметров.
Заключая изложение материала, приводим краткую характеристику и нормальные показатели основных методов исследования системы гемостаза в педиатрической практике.
Набор базисных параметров коагулограммы
1. Время кровотечения по Дьюку: определяется длительность кровотечения из про кола мочки уха. Глубина прокола 3,5 мм. Метод Айви: проколы глубиной 1-2мм на пе редней поверхности предплечья после компрессии плеча манжеткой (давление 80 мм Hg). Нормальные значения теста не превышают 5 мин. (2-4 мин.).
2. Количество тромбоцитов: нормальные значения 150-400 тыс. кровяных пласти нок в 1 куб. мм.
3. Ретракция кровяного сгустка (определение количества сыворотки, образующейся после свертывания в пробирке крови больного). В норме этот показатель составляет 46- 64%. Используется для диагностики некоторых тромбоцитопатий. Ложно завышается при анемиях, гипофибриногенемии, а занижается при увеличении гематокрита (эритремия), полиглобулии.
4. Агрегационная функция тробмоцитов: исследуется при добавлении к БТП про порционального объема индукторов агрегации в различных разведениях физиологиче ских (АДФ, адреналина, тромбина, коллагена) и нефизиологического (ристомицина) и ре гистрируется время появления крупных агрегатов («синдром снежной бури») на предмет ном стекле или с помощью агрегометра. Данные соотносятся с контрольными исследова ниями. Нормальные показатели агрегации на стекле при использовании стандартизиро ванных индукторов агрегации для скрининговой диагностики (фирма «ТехнологияСтандарт», г.Барнаул): АДФ-17-25сек, адреналин - 18-23сек., коллаген - 15-17сек, ристомицин- 19-22сек.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.