Гемокорректоры. Основные требования к гемокорректорам. Функциональная классификация, страница 15

4. Наличие агглютинации со всеми сыворотками не даёт право отнести её к АВ (IV) группе, так как это возможно панагглютинация. В этом случае на тарелку наносят две капли стандартной сыворотки АВ(IV) группы и добавляют  к ним маленькую каплю эритроцитов исследуемой крови. Через 5 минут оценивают результат, если со стандартной сывороткой AB(IV) группы не произошло агглютинации, - исследуемая кровь – AB(IV) группы.

Таблица №1

+   -  наличие агглютинации.

_   -  отсутствие агглютинации.  

Определение групп крови стандартными

отмытыми   эритроцитами

Из вены берут 3-4 мл крови в пробирку и центрифугируют без добавления цитрата, чтобы можно было взять отдельно сыворотку. Стандартные эритроциты группы O(I), A(II), B(III) готовят в учреждениях службы крови.

В 10 –20 % взвесь стандартных эритроцитов, для продления срока хранения добавляют специальные консервирующие растворы.

Тарелку маркируют и берут каплю исследуемой сыворотки, к которой добавляют каплю стандартных эритроцитов в 5 раз меньше капли сыворотки. Палочками перемешивают капли и в течение 3 минут покачивают тарелку, затем добавляют по 1 капли изотонического раствора хлорида натрия. Через 5 минут читают результат:

1.  Агглютинация отсутствует с эритроцитами O(I) и определяется с эритроцитами A(II) и B(III) – исследуемая кровь O(I);

2.  Агглютинация отсутствует с эритроцитами О(I) и А(II) и определяется с эритроцитами В(III) – исследуемая кровь A(II);

3.  Агглютинация отсутствует с эритроцитами O(I) и B(III), определяется с эритроцитами A(II) – исследуемая кровь В(III);

4.  Агглютинация отсутствует со всеми стандартными  эритроцитами – исследуемая кровь AB (IV) группы.

Таблица №2

+ - наличие агглютинации

_ - отсутствие агглютинации.

Определение групп крови стандартными эритроцитами чаще всего проводится на одной тарелке со стандартными гемагглютинирующими сыворотками и называется двойной реакцией или перекрестной. Одновременно в исследуемой крови определяется наличие агглютиногенов и агглютининов.

Определение групп крови цоликлонами анти-А и анти-В

Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитическую жидкость мышей носителей, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М, напрвленные против группоспецифических антигенов А и В человека. Цоликлоны не содержат антител другой специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов. Цоликлоны анти-А и анти-В выпускаются во флаконах, в которых, кроме реагента, содержаться консервант (0,1 раствор азида натрия) и соответствующий краситель – анти-А окрашен в розовый цвет, а анти-В в синий. Выпускаются флаконы по 50-100 доз. Срок хранения 2 года при температуре от +2⁰С до +8⁰С.

Для определения групповой принадлежности кровь берут из пальца или из вены. После маркировки планшета или тарелки надписями «анти-А» и «анти-В», пипеткой наносят по 0,1 мл реагента анти-А и анти-В соответственно надписи. Рядом с каплей реагента помещают маленькую каплю крови (соотношение 1: 10, 1: 8), тщательно перемешивают стеклянными палочками и покачивают планшет в течение 3 минут до появления агглютинации в виде хлопьев в случае положительной реакции. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной.     

Оценка результатов 

1.  Если нет агглютинации, следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В и кровь принадлежит к О(I) группе.