Практикум по биохимии. Часть I. Физико-химические методы: Учебное пособие

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Факультет естественных наук

В. И. ЯМКОВОЙ, Л. М. ХАЛИМСКАЯ

ПРАКТИКУМ ПО БИОХИМИИ

Часть I

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ

МЕТОДЫ

Учебное пособие

Новосибирск

2007

ББК Е902я73-1

УДК 577.1 (075)

Ямковой В. И., Халимская Л. М. Практикум по биохимии. Часть I. Физико-химические методы: Учеб. пособие / Новосиб. гос. ун-т. Новосибирск, 2007. 91 с.

Учебное пособие предназначено для студентов 3-го курса биологического отделения факультета естественных наук и медицинского факультета. Пособие включает в себя I часть практикума по биохимии.

Рецензент: доцент С. Д. Мызина

Одобрено методическим советом факультета естественных наук Новосибирского государственного университета.

© Новосибирский государственный

                                                             университет, 2007

Содержание

введение

Практикум по биохимии на 3 курсе состоит из двух частей: физико-химические методы и аналитическая биохимия. Часть I содержит практические биохимические задачи, которые решаются с использованием законов и выводов физической химии и кинетики. Основой подготовленного издания послужили разработанные ранее на кафедре молекулярной биологии методические пособия. Задачи были впервые поставлены В. К. Райтом, В. И. Ямковым, В. С. Богачевым и Н. М. Тепловой.

Для написания теоретических введений к ряду разделов были использованы изданные на кафедре физической химии НГУ методические пособия:

Е. С. Рудаков. Спектрофотометрия, кислотно-основные равновесия. Новосибирск. НГУ. 1966;

Ф. А. Кузнецов. Потенциометрия. Новосибирск. НГУ. 1964;

Е. С. Рудаков. Кинетика реакций в растворах. Новосибирск. НГУ. 1967;

Е. С. Рудаков, Г. А. Березовский. Хроматография. Новосибирск. НГУ. 1968.

1. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ

1.1 Область приложений метода

Спектрофотометрия нашла широкое применение в химии для определения степени чистоты веществ и растворителей, для определения концентрации оптически активных частиц в растворах, для анализа смесей, для изучения равновесий, кинетики химических реакций, кислотности растворов, кислотно-основных свойств веществ, для изучения строения и энергетических свойств молекул. Применяют также спектрофотометрическое титрование.

Колориметрия представляет частный случай спектрофотометрии. С помощью колориметров изучают поглощение света веществом на нескольких фиксированных длинах волн.

1.2. Понятие об электронных спектрах поглощения

В 1672 г. Ньютон установил, что «окрашенные» лучи – красного, оранжевого, желтого, зеленого, голубого, синего и фиолетового цветов, выходящие из стеклянной призмы при её освещении солнечным светом, являются составными элементами белого света. Роль призмы сводится только к расщеплению смеси этих «индивидуальных» лучей. Таким образом, возникло представление о спектре белого света.

В 1800 г. Гершель установил, что термометр, помещенный за красным (длинноволновым) концом спектра, показывает увеличение температуры. Невидимые лучи, располагающиеся за красным концом спектра и несущие тепловую энергию, названы тепловыми или инфракрасными лучами. Методом почернения фотопластинок Риттер в 1831 г. открыл невидимые ультрафиолетовые лучи, входящие в ультрафиолетовую часть спектра, расположенную за фиолетовым концом видимой части спектра. Эти наблюдения положили начало исследованиям по поглощению света веществом (абсорбционная спектроскопия).