Лабораторный практикум для студентов технологических специальностей, страница 46

3. Растворы перемешивают, переливают в измерительные пробирки и ставят в гнезде ящика для защиты от света.

4. Приготовляют раствор рибофлавина из таблетки, полученной от лаборанта. Для этого помещают таблетку в мерную колбу на 100 см³,добавляют горячей (70- 80°C) дистиллированной воды до 2/3 объема и растворяют таблетку. Охлаждают колбу до комнатной температуры и заполняют дистиллированной водой до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Отбирают пипеткой 3 см³ этого раствора в мерную колбу на 100 см³ №6, добавляют дистиллированной воды до метки и перемешивают. Из колбы №6 раствор переливают в пробирку №6 и ставят в гнездо ящика.

Измерение флуоресценции на флуориметре ЭФ – ЗМА

1. Помещают в измерительную камеру пробирку с раствором IV. Проверяют настройку на нуль и нажав клавишу заслонки, устанавливают рукояткой стрелку на 80 делений.

2. Вынимают пробирку IV и, последовательно помещая в камеру пробирки I, II, III, IV, V и VII, измеряют интенсивность их лиминисценции дважды. Флуориметр должен работать не более 30 минут, после чего его выключают для охлаждения.

3. По величинам интенсивности стандартных растворов I, II, III, IV строят градуировочный график, имеющий прямолинейный характер.

4. Используя его определяют содержание рибофлавина в контрольном растворе (пробирка V). При удовлетворительных результатах (ошибка не должна превышать 2-3%) приступают к определению его в таблетках.

5. Проводят гашение люминесценции рибофлавина, предварительно повторив измерение растворов VI и VII. Для гашения восстанавливают рибофлавин гидросульфитом натрия. Добавляют в пробирки по 0,5 г гидросульфита, закрывают пробкой и перемешивают 30 сек.

6. Проверяют настройку прибора по стандартному раствору IV и снова измеряют свечение в прбирках VI и VII. Если стрелка прибора отклонилась на 0,5-1 деление, считают полученную ранее величину интенсивности правильной. При значительном отклонении стрелки его учитывают при содержании вещества.

Расчет содержания  рибофлавина в таблетках

Содержание рибофлавина в мкг находят по градуировочному графику и, взяв среднее значение из двух определений, рассчитывают содержание В₂ в таблетках (драже) по формуле:

Q_{рибофлавина} = х_мкг · 10^-6 ·100см³,

где    х_мкг – количество В₂ в 1 см³,

         10^-6 – фактор пересчета микрограмм в граммы

РЕФРАКТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Рефрактометрия – исследование преломления света при прохождении луча через границу раздела прозрачных однородных сред и заключается в измерении показателя (или коэффициента) преломления исследуемого раствора, связанного с его концентрацией.

При падении луча света на границу раздела двух прозрачных сред от поверхности раздела и частичное отражение света от поверхности раздела и частичное распространение света в другой среде.

Направление луча во второй среде изменяется в соответствии с законом преломления:

                  n_2(отн.)                               (1)

Величину n_2(отн.) называют  относительным коэффициентом преломления второй среды по отношению к первой. Показатель преломления по отношению к вакууму называют абсолютным показателем преломления:

n_2(абс.) =  

относительный показатель преломления равен отношению абсолютных показателей преломления:

n_(абс) · sinα₁ = n_2(абс) · sinα₂

Относительный показатель преломления по отношению к воздуху называют просто показателем преломления n:

n_абс. = n_{абс.(возд.)} · n     ,   поэтому