Микробиологическая диагностика брюшного тифа, паратифов А и В. Пищевые отравления бактериальной этиологии. Микробиологическая диагностика сальмонеллезов. Острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ). Вирусологическая диагностика заболеваний, вызываемых ортомиксовирусами, парамиксовирусами и аденовирусами. Герпесвирусы, страница 8

Стадии патогенеза и основные клинические проявления холеры ______

_________________________________________________________________

V.chоlerae.        ┌──────────────────┐

Окраска по Граму.  │                  │

Ув.х               │                  │

└──────────────────┘

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ

Обследованию на холеру подлежат не только больные, но и все проживающие в очаге люди для выявления скрытых форм заболевания и бактерионосительства.

Используют два метода диагностики: основной - бактериологический, дополнительный - серологический.

Забор и доставка материала в лабораторию осуществляется обязательно медицинским работником в условиях, обеспечивающих полную безопасность.

Бактериологическое исследование проводится в специальных лабораториях с соблюдением строгого противоэпидемического режима.

Различают классический и ускоренный методы диагностики.

 2Классическое исследование:

1 этап.

1.Микроскопия материала (окраска по Граму, фуксином и препарата

"раздавленная капля").

2.Посев материала на среду обогащения - 1% пептонную воду.

3.Посев материала на щелочной МПА и среду TCBS.

Инкубация в термостате при t 37 50 0С.

2 этап (через 6 часов).

1.Учет характера роста на первой пептонной воде (нежная голубая пленка).

2.Микроскопия мазков из пленки,окраска по Граму,фуксином и на подвижность.

3.Пересев на вторую пептонную воду для дальнейшего обогащения.

4.Пересев из первой пептонной воды на щелочной агар и среду TCBS.

3 этап (через 12 часов).

1.Учет роста на второй пептонной воде (аналогично первой).

2.Изучение характера роста на пластинчатых питательных средах

(см. демонстрационные посевы):

- отбор желтых колоний со среды TCBS и прозрачных голубых "росинок" с щелочного МПА;

- микроскопия окрашенных по Граму и фуксином мазков из подозрительных колоний;

- определение подвижности в препаратах "раздавленная" капля;

- постановка РА на стекле с О1, Инаба- и Огава- сыворотками.

3.Пересев агглютинабельных колоний на среду Клиглера.

На этом этапе может быть дан предварительный ответ.

4 этап (через 18 часов).

1.Учет изменения лактозо-сахарозной среды.

Результат: __________________________________

__________________________________

(рисунок)

2.Проверка чистоты культуры - мазок по Граму.

3.Идентификация выделенной культуры:

- развернутая реакция агглютинации с холерными сыворотками О1,Инаба-,

Огава-, RO-;

- определение чувствительности к холерным диагностическим бактериофагам;

- определение принадлежности к биохимической группе Хейберга и других биологических свойств (результаты демонстрационных посевов внесите в таблицу):

┌────────────┬───────────────────────────────────────────────────┐

│            │               Ферментация                         │

│ ГРУППА     ├─────────────┬────────────────────┬────────────────┤

│            │   Манноза   │    Сахароза        │   Арабиноза    │

├────────────┼─────────────┼────────────────────┼────────────────┤

│   I        │             │                    │                │

│   II       │             │                    │                │

│   III      │             │                    │                │

│   IY       │             │                    │                │

└────────────┴─────────────┴────────────────────┴────────────────┘

Постановка нитрозоиндоловой пробы.

Принцип метода:  К бульонной культуре вибрионов на пептонной воде добавляют несколько капель серной кислоты. При положительной реакции вследствие образования нитрозоиндола появляется розовое окрашивание. Холерные вибрионы обоих биоваров дают резко положительную нитрозоиндоловую пробу.

Результат: ______________________________________________________

Выделенная культура, имеющая характерные для вибрионов морфологические и культуральные свойства,  агглютинирующаяся групповой (О1) и вариантоспецифическими (Огава-, Инаба-) холерными сыворотками, принадлежащая к первой хемогруппе по Хейбергу и лизирующаяся диагностическим холерным фагом, идентифицируется как вид  2Vibrio cholerae.