Микробиологическая диагностика брюшного тифа, паратифов А и В. Пищевые отравления бактериальной этиологии. Микробиологическая диагностика сальмонеллезов. Острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ). Вирусологическая диагностика заболеваний, вызываемых ортомиксовирусами, парамиксовирусами и аденовирусами. Герпесвирусы, страница 57

│                               │                                │

│                               │                                │

│                               │                                │

│                               │                                │

└───────────────────────────────┴────────────────────────────────┘

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПОЛИОМИЕЛИТА

I.Вирусологический метод

Исследуемый материал ___________________________________________

___________________________________________

1 этап

Подготовка исследуемого материала: суспензирование, центрифугирование и обработка антибиотиками.

2 этап

Заражение культур клеток  Hela, ФЭЧ (фибробласты эмбриона человека) и др. Инкубация в течение 3-7 дней с ежедневным осмотром.

3 этап

Выявление вируса по ЦПД.  Пассажи вируса на культурах клеток  для дифференциации ЦПД вируса от возможного токсического действия исследуемого материала.                     ┌───────────┐

ЦПД вируса  │           │

полиомиелита  │           │

│           │

└───────────┘

4 этап

Титрование вируса для выбора рабочей дозы перед постановкой реакции нейтрализации.

┌─────────┬──────────────────────────────────────────┬─────────┐

│Результат│Разведения вирусосодержащего материала    │Контроль │

│         │───────┬───────┬───────┬───────┬──────────┤культуры │

│         │ 1/10  │1/100  │1/1000 │1/10000│1/100000  │клеток   │

│─────────┼───────┼───────┼───────┼───────┼──────────┼─────────┤

│ ЦПД+/-  │       │       │       │       │          │         │

└─────────┴───────┴───────┴───────┴───────┴──────────┴─────────┘

Титр вируса:___________________________________________________

Рабочая доза для РН:___________________________________________

5 этап

Идентификация (серотипирование) вируса в РН.

1.РН с поливалентной сывороткой.

Исследуемый материал:____________________________________________

Диагностический препарат:________________________________________

_________________________________________________________________

Дополнительные ингредиенты реакции:______________________________

_________________________________________________________________

Реакция инкубируется в термостате в течение нескольких дней.

Учет результатов проводится после появления ЦПД в пробирке "Контроль дозы вируса".

┌───────────┬─────────────────┬────────────────┬─────────────────┐

│ Результат │   Опыт          │Контроль дозы   │Контроль культуры│

│           │(100доз вируса + │вируса (100 доз │клеток           │

│           │сыворотка + куль-│вируса + культу-│(культура клеток)│

│           │тура клеток)     │ра клеток)      │                 │

├───────────┼─────────────────┼────────────────┼─────────────────┤

│  ЦПД +/-  │                 │                │                 │

└───────────┴─────────────────┴────────────────┴─────────────────┘

Вывод:__________________________________________________________

________________________________________________________________

2.РН с моновалентными сыворотками.

┌──────────┬────────────────────────┬─────────────┬──────────────┐

│ Результат│100доз + моновалентные  │Контроль дозы│Контроль куль-│

│          │сыворотки (S)           │вируса       │туры клеток   │

│          ├───────┬───────┬────────┤             │              │

│          │SIтипа │SIIтипа│SIIIтипа│             │              │

├──────────┼───────┼───────┼────────┼─────────────┼──────────────┤

│  ЦПД +/- │       │       │        │             │              │

└──────────┴───────┴───────┴────────┴─────────────┴──────────────┘

Вывод:__________________________________________________________

Заключение

Вирусы полиомиелита,  выделенные из материала от больного  направляются в специализированную лабораторию, где проводится дифференциация вакцинных и "уличных" штаммов.  Используется ряд дополнительных тестов,  например,  сопоставляется интенсивность репродукции вируса при 40 и 23С. Вакцинные штаммы лучше размножаются при 23С.

II.Серодиагностика