│ │ │
│ │ │
│ │ │
│ │ │
└───────────────────────────────┴────────────────────────────────┘
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПОЛИОМИЕЛИТА
I.Вирусологический метод
Исследуемый материал ___________________________________________
___________________________________________
1 этап
Подготовка исследуемого материала: суспензирование, центрифугирование и обработка антибиотиками.
2 этап
Заражение культур клеток Hela, ФЭЧ (фибробласты эмбриона человека) и др. Инкубация в течение 3-7 дней с ежедневным осмотром.
3 этап
Выявление вируса по ЦПД. Пассажи вируса на культурах клеток для дифференциации ЦПД вируса от возможного токсического действия исследуемого материала. ┌───────────┐
ЦПД вируса │ │
полиомиелита │ │
│ │
└───────────┘
4 этап
Титрование вируса для выбора рабочей дозы перед постановкой реакции нейтрализации.
┌─────────┬──────────────────────────────────────────┬─────────┐
│Результат│Разведения вирусосодержащего материала │Контроль │
│ │───────┬───────┬───────┬───────┬──────────┤культуры │
│ │ 1/10 │1/100 │1/1000 │1/10000│1/100000 │клеток │
│─────────┼───────┼───────┼───────┼───────┼──────────┼─────────┤
│ ЦПД+/- │ │ │ │ │ │ │
└─────────┴───────┴───────┴───────┴───────┴──────────┴─────────┘
Титр вируса:___________________________________________________
Рабочая доза для РН:___________________________________________
5 этап
Идентификация (серотипирование) вируса в РН.
1.РН с поливалентной сывороткой.
Исследуемый материал:____________________________________________
Диагностический препарат:________________________________________
_________________________________________________________________
Дополнительные ингредиенты реакции:______________________________
_________________________________________________________________
Реакция инкубируется в термостате в течение нескольких дней.
Учет результатов проводится после появления ЦПД в пробирке "Контроль дозы вируса".
┌───────────┬─────────────────┬────────────────┬─────────────────┐
│ Результат │ Опыт │Контроль дозы │Контроль культуры│
│ │(100доз вируса + │вируса (100 доз │клеток │
│ │сыворотка + куль-│вируса + культу-│(культура клеток)│
│ │тура клеток) │ра клеток) │ │
├───────────┼─────────────────┼────────────────┼─────────────────┤
│ ЦПД +/- │ │ │ │
└───────────┴─────────────────┴────────────────┴─────────────────┘
Вывод:__________________________________________________________
________________________________________________________________
2.РН с моновалентными сыворотками.
┌──────────┬────────────────────────┬─────────────┬──────────────┐
│ Результат│100доз + моновалентные │Контроль дозы│Контроль куль-│
│ │сыворотки (S) │вируса │туры клеток │
│ ├───────┬───────┬────────┤ │ │
│ │SIтипа │SIIтипа│SIIIтипа│ │ │
├──────────┼───────┼───────┼────────┼─────────────┼──────────────┤
│ ЦПД +/- │ │ │ │ │ │
└──────────┴───────┴───────┴────────┴─────────────┴──────────────┘
Вывод:__________________________________________________________
Заключение
Вирусы полиомиелита, выделенные из материала от больного направляются в специализированную лабораторию, где проводится дифференциация вакцинных и "уличных" штаммов. Используется ряд дополнительных тестов, например, сопоставляется интенсивность репродукции вируса при 40 и 23С. Вакцинные штаммы лучше размножаются при 23С.
II.Серодиагностика
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.