3. Продукция лимфокинов. Лимфокины относятся к биологически активным веществам, выделяемым сенсибилизированными лимфоцитами. Они характеризуются определенным биологическим действием, которое определяют в реакциях:
а) реакция торможения миграции макрофагов. Эта реакция, используется для выявления иммунного ответа к возбудителям инфекций, для доказательства аутосенсибилизации;
б) реакция торможения миграции лейкоцитов. Это модификация предыдущей реакции, в ней используются лейкоциты периферической крови. Ее применяют для оценки активности лимфоцитов при бактериальных инфекциях, ауто- и контактной сенсибилизации, лекарственной аллергии, реакциях трансплантационного иммунитета. При опухолевых процессах данный метод ограничен экспериментальной моделью.
Для оценки функциональной активности В-лимфоцитов применяют тесты:
1.
Определение уровня иммуноглобулинов в реакции преципитации в геле по
Манчини. Результаты реакции оценивают по величине
зон
преципитации исследуемых иммуноглобулинов в сравнении с размерами зон стандартных
иммуноглобулинов.
2. Определение концентрации антител в крови к наиболее распространенным в природе антигенам (эритроцитарные антигены А и В, О-стрептолизин и др.).
3.
Определение концентрации антител, образующихся в ответ на
введение
оттитрованных количеств микробных антигенов: дифтерийного
анатоксина, полисахаридов
менингококка, убитой полиомиелитной вакцины.
4. Оценка катаболиза и синтеза каждого класса иммуноглобулинов с помощью введения меченого иммуноглобулина соответствующего класса и определение динамики выведения метки из организма.
ЗАНЯТИЕ 29
ТЕМА: ОСОБЕННОСТИ ПРОТИВОВИРУСНОГО ИММУНИТЕТА. РЕАКЦИИ ИММУНИТЕТА ПРИ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Цель занятия: Освоить особенности противовирусного иммунитета. Изучить сущность и методы постановки реакций иммунитета при вирусных инфекциях, оценку их, информативность.
План занятия
1. Неспецифические факторы противовирусного иммунитета: тканевая ареактивность, интерферон, ингибиторы сыворотки крови. Их свойства, механизм действия .
2. Реакции иммунитета при вирусных инфекциях: преципитации, РНГА, РСК, нейтрализации вируса, РТГА, торможения гемадсорбции, методы постановки
Методические указания к демонстрации и практической работе
Реакция нейтрализации вируса
Реакция нейтрализации вируса основана на способности противовирусных антител погашать инфекционное действие вируса.
Источником вируса в реакции служат жидкости и экстракты инфицированных культур клеток, куриных эмбрионов, органов зараженных животных. Вируссодержащий материал освобождают от крупных, частиц, гомогенизируют и титруют для выяснения его биологической активности. Источником, антител служат иммунные сыворотки или парные сыворотки больных. Реакция нейтрализации широко используется в диагностике вирусных инфекций, как для обнаружения антител, так и для определения типа выделенного вируса.
Нейтрализующее действие антител можно обнаружить в опытах на животных. Для этого вируссодержащий материал смешивают с сывороткой, выдерживают смесь 1-2 часа и вводят животным. Если вирус нейтрализован антителами, животное не погибает.
Реакцию нейтрализации можно поставить в культуре ткани. В этом случае реакцию ставят тремя способами: 1) с учетом результатов по цитопатогенному эффекту; 2) методом цветной пробы; 3) по гемадсорбции.
Для постановки реакции с учетом результатов по цитопатогенному эффекту готовят разведения вируса кратные десяти для определения титра вируса и заражают однослойную культуру ткани. Через 5-7 дней клеточный слой разрушается, за титр вируса принимают то его наибольшее разведение,
Схема 13
Факторы неспецифической резистентности
 |
Альфа- и бета-ингибиторы Температурный фактор Интерферон Клеточная ареактивность
сыворотки крови
 |
 |
 |
 |
||||
Фагоцитоз
Связывают
вирус Задерживает и подавляет Нарушение
трансляции Отсутствие клеток
репродукцию вирионов иРНК способных
Блокирует его адсорбцию Стимулирует
продукцию Прекращение синтеза поддерживать
на рецепторах клеток интерферонов белка репродукцию вирусов
Стимулирует иммунный
ответ Захват клеток, пораженных
вирусом
Схема 14
Реакция нейтрализации при вирусных заболеваниях
 |
Варианты
Нейтрализация
Нейтрализация Цветная проба
реакции инфекционного действия цитопатогенного действия подавление клеточного метаболизма
 |
 |
 |
|||
Копмоненты Вирус- Иммунная Вирус- Иммунная Однослойная Вирус- Иммунная Тканевые
содержащий сыворотка содержащий сыворотка культура содержащий сыворотка культуры
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.