Основы диагностики и терапии антифосфолипидного синдрома, страница 5

Реагент

Время свертывания, с (Х±т)

Удлинение, %

Контроль (здоровые люди), п=50 (1)

Больные с ВА, п=31 (2)

А. АПТВ(ВА+)

28,4±0,3

38,6±2,8 Сй-2<0,001

35,9

Б. АПТВ(ВА-)

34,1 ±0,6

37,4±2,6 Сй-2>0,2

9,7

В. APTT-LS

35,0±0,2

51,1±2,3 Сй_2<0,001

46,0

1.3. Апробация скринингового протромбинового (ВА+) и проти-вовесного (ВА-) - тестов

Аналогично АПТВ нами были разработаны тромбопластиновые реагенты, обладающие высокой и низкой чувствительностью к эффектам ВА - ПТВ (ВА+) и ПТВ (ВА-). Результаты их испытания представлены в табл. 4.

Таблица 4

Сравнительное исследование тромбопластиновых реагентов по их чувствительности к действию ВА

Реагент

Время свертывания, с (Х±гл)

Удлинение, %

Контроль (здоровые люди), п=50 (1)

Больные с ВА, п=12   (2)

А. ПТВ (ВА+)

37,4±0,6

49,8±5,4 Сй-2<0,001

33,2

Б. ПТВ (ВА-)

43,0±1,2

43,5±1,8 Р1-2>0,5

1,0

Вместе с тем в литературе мы не нашли обоснованного ответа на вопрос, какую степень гипокоагуляции в скрининговых тестах можно считать значимой. Исследования, проведенные нами, позволили считать, что диагностически значимыми являются удлинения времени свертывания в скрининговых тестах на 20% и более.

II этап - коррекционные (подтверждающие) тесты.

В тех пробах, в которых была выявлена гипокоагуляция на этапе скрининга, тесты повторяются при добавлении в избытке компенсирующих фосфолипидных мембран (ФМ). В качестве последних обычно используют разрушенные нормальные тромбоциты, фосфо-липидные липосомы или гексагональные фосфолипиды. В наших исследованиях было проведено сравнение использования для этой цели отмытых, а затем разрушенных тромбоцитов (препарат тром-боцитин, Технология-Стандарт) и эритрофосфатида (Технология-Стандарт или Эрилид фирмы Ренам).

При наличии в исследуемой плазме АФА со свойствами ВА введение избытка ФМ приводит к устранению гипокоагуляции и нормализации результатов тестов. В отличие от этого при наличии в плазме других ингибиторов свертывания гипокоагуляция с помощью ФМ не корригируется. В табл. 5 приведены результаты коррекции с двумя источниками ФМ.

Таблица 5

Показания коррекционных тестов с разрушенными тромбоцитами и эритрофосфатидом у больных с АФС

Тест

Время свертывания, с (X ± т)

Исходные показатели

С

После добавления в тест-систему

С

контроль (здоровые)

больные сАФС

разрушенных тромбоцитов

эритро-фосфа-тида

Про-тромбиновый

40,1 ±0,8

49,8±5,4

<0,001

41,5±6,3

41 ,3±5,0

>0,5

Лебетоксовый

39,4±0,5

61,4±4,2

<0,001

40,4±0,9

38,2±1,8

>0,5

Каолиновый

68,4±0,6

94,7±2,9

<0,001

65,8+8,8

63,3±5,0

>0,5

Из табл. 5 следует, что оба примененных фосфолипидных компонента дали у обследуемых больных нормализацию показаний скри-нинговых тестов, что подтверждает связь гипокоагуляции с действием АФА. При выполнении этих коррекционных тестов необходима предварительная сверка эффектов эритрофосфатида со стандартными фирменными ФМ.

Кроме того, в нашей лаборатории разработана оригинальная методика определения эффектов ВА методом фильтрационного удаления из БТП фосфолипидных мембран, нагруженных и не нагруженных АФА. Эта методика, в которой определяется действие на коагуляционную активность плазмы больных как удаления, так и возврата плазменных ФМ, несущих на себе в том или ином количестве АФА, позволяет не только уточнить диагноз АФС, но и дать полуколичественную оценку содержания в плазме больного таких заблокированных антителами мембран [23].