Основы диагностики и терапии антифосфолипидного синдрома, страница 13

комнатной температуре (+18...+25°С). 4. Планшет переворачивают вверх дном и резким движением вытряхивают из него жидкость, промакивают фильтровальной бумагой. Затем планшет промывают трижды промывочным буфером, удаляют остатки жидкости. 5. Вносят в каждую лунку по 100 мкл ферментного конъюгата против выбранного класса иммуноглобулинов (анти-lgG или анти-lgM). б. Инкубируют 15 мин, при комнатной температуре (+18...+25°С). 7. Промывают планшет, как в п. 4. 8. Вносят в каждую лунку по 100 мкл раствора субстрата. 9. Инкубируют 15 мин при комнатной температуре. 10. Добавляют в каждую лунку по 50 мкл останавливающего раствора, планшет несколько раз встряхивают для перемешивания содержимого лунок.

В 15-минутный интервал времени после остановки реакции измеряют в лунках оптическую плотность (ОП) на фотометре-ридере при 450 нм.

Результаты

При определении антител к фосфатидилсерину. Результаты для IgG- и lgM-антител к фосфатидилсерину подсчитываются раздельно. Для каждого образца сыворотки, контроля и калибратора* вычисляют средние значения ОП₄₅о в двух параллельных лунках за вычетом значения бланк-контроля. Концентрацию антител к фосфатидилсерину (в ед/мл) в образце сыворотки рассчитывают по формуле:

Концентрация образца (ед/мл) =

Концентрация калибратора (ед/мл) ч образца или контроля

ОП₄о5 калибратора

Концентрации калибраторов, например, IgG 60 усл. ед/мл, IgM 60 усл. ед/мл. Ориентировочные значения нормы и патологии (рекомендуемые фирмой-изготовителем тест-системы) приведены в табл. 8.

При определении антител к кардиолипину. Результаты для определения IgG-, IgM- и lgA-антител к кардиолипину также оцениваются раздельно. Концентрацию данных антител (в ед/мл) в образце рассчитывают по формуле:

____OPUos образца или контроля____

Концентрация образца (ед/мл) =    OFUos калибратора ч Концентрация калибратора (ед/мл)

Критерии оценки результатов определения антител к фосфатидилсерину

Таблица 8

Примерные значения нормы и патологии (рекомендуемые фирмой-изготовителем тест-системы) приведены в табл. 9.

Приведённые в табл. 8 и 9 значения нельзя использовать для расчетов, они служат лишь в качестве ориентировочного руководства. В каждой лаборатории должен быть установлен свой собственный диапазон нормальных значений, зависящий от тестируемой популяции.

3. ОСНОВЫ ТЕРАПИИ АНТИФОСФОЛИПИДНОГО СИНДРОМА

Лечение вторичного и первичного антифосфолипидного синдрома неодинаково.

При вторичном АФС, связанном с СКВ или другими системными, иммунными или лимфопролиферативными заболеваниями, проводят лечение основного заболевания иммуносупрессорами гормонального (глкжокортикоиды) или цитостатического действия [26]. К этой базисной терапии с целью устранения эффектов АФА, обладающих свойствами ВА, дополнительно при необходимости подключают терапию антикоагулянтами и антиагрегантами. Важным компонентом терапии является проведение этапного плазмафереза [6,17,

26, 27].

При первичном АФС и отсутствии ишемий органов и тромбозов необходимо диспансерное наблюдение за больным. В случаях же нарушений кровообращения в органах и возникновения тромбозов терапию следует начинать с назначения антикоагулянтов, антиагре-гантов и дискретного (этапного) плазмафереза.