Занятие №23. Патогенез желтух. Занятие I
Цельзанятия
1. Качественное определение билирубина в сыворотке по ВанденБергу.
2. Количественное определение билирубина в сыворотке по Бокальчуку.
3. Качественное определение уробилина и качественное опреде ление желчных пигментов в моче.
Качественное определение билирубина в сыворотке по Ванден-Бергу
Прямая реакция: в две исследуемые центрифужные пробирки наливают по 0,5 мл исследуемой сыворотки №1 и №2. В каждую пробирку наливают по 1 мл дистиллированной воды. Содержимое пробирок встряхивают и прибавляют диазореактив в количестве 0,25 мл. Затем наблюдают за изменением окраски в пробирке. При наличии билирубина "В" появляется розовое окрашивание сыворотки.
Непрямая реакция: в центрифужную пробирку берут сыворотку в количестве 0,5 мл (сыворотка берется та, где не получилась прямая реакция), добавляется спирт в количестве 1 мл для осаждения бел ков. Содержимое пробирки хорошо перемешивают и центрифуги руют, сливают в другую пробирку и прибавляют диазореактив в количестве 0,25 мл. Появление розовой окраски указывает на на личие в сыворотке билирубина "А". Качественное определение желчных пигментов в моче (проба Розина)I
В пробирку наливают примерно 5 мл нефильтрованной мочи и на нее наслаивают 1-2 мл 1% спиртового раствора йода. При наличии желчных пигментов на границе жидкостей появляется зеленое кольцо, которое долго держится. Качественное определение уробилина в моче (реакция Богомолова)
К 8-10 мл профильтрованной мочи прибавляют 2-3 мл насы-иого водного раствора медного купороса. Если получается муть
54
Занятие №23. Патогенез житух. Занятие I_____
образования гидрата окиси меди, то прибавляют крепкой HQ (2-3 капли) до просветления раствора. Через 5 минут прибавляют 2-3 ил хлороформа и несколько раз несильно встряхивают. В присутствии уробилина хлороформ окрашивается в розовато-красный цвет или, в зависимости от количества уробилина, в медно-красный цвет. Количественное определение билирубина по БокальчукуI
В шести пробирках делают разведения сыворотки (сыворотка берется та, которая содержит билирубин "В") следующим образом: в первую пробирку вносят 1 мл сыворотки, а в остальные пробирки — по 0,5 мл физраствора. Из первой пробирки 0,5 мл сыворотки переносят во вторую, где тщательно смешивают и опять переносят 0,5 мл разведенной сыворотки в следующую пробирку и т.з. Из последней пробирки удаляют 0,5 мл разведенной сыворотки. Получается ряд разведений. Затем в каждую пробирку наливают по 0,25-0,5 мл диазореактива и встряхивают. Через 2-3 минуты наблюдают, в какой пробирке еще имеется розовое окрашивание. Количество билирубина в последнем разведении сыворотки, еще дающей реакцию, соответствуют содержанию 0.016 мг билирубина в 1 мл или 1,6 в 100 мл сыворотки. Приняв во внимание степень разведения и умножив на 1,8 получают содержание билирубина в данной сыворотке, выраженное в мг на 100 мл сыворотки.
Занятие№24. Патогенезжелтух. ЗанятиеII
Цельзанятия
1. Изучение общетоксического действия желчи.
2. Изучение токсического действия желчи на сердце лягушки.
3. Изучение влияния желчи на рефлекторную возбудимость, щ
Общетоксическое действие желчи
Опыт ставится на лягушке, которой инъецируют в подкожное лимфатическое пространство 2-3 см1 желчи. Через 10-15 минут развивается резкое угнетение: лягушка, положенная на спину, оказывается неспособной перевернуться на живот. Она почти не реагирует на уколы иглой.
Изучение токсического действия желчи на сердце
лягушкиШ
Две лягушки укрепляются на дощечке булавками брюшком
кверху. Ножницами продольно разрезают кожу на груди, пинцетом
захватывают грудную косточку и срезают ее по краям, обнажают
сердце, освобождают его из сорочки и, перерезав уздечку, верхушку]
Η
Часть II. Патофизиология органов и
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.