ВЕЩЕСТВА, ИЗОЛИРУЕМЫЕ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА МИНЕРАЛИЗАЦИЕЙ
В анализе методы минерализации используют при исследовании биологического материала на наличие т.н. «металлических ядов».
Важнейшие металлические яды (далее – МЕ яды) - соединения металлов и некоторых неметаллов: бария, стронция, свинца, марганца, хрома, серебра, меди, висмута, цинка, сурьмы, таллия, кадмия, ртути, мышьяка.
Токс действие МЕ ядов обеспечивается способностью МЕ ионов образовывать прочные комплексы с рекционноспособными функциональными группами и структурными фрагментами аминокислот, пептидов, белков и др. биогенных структур (далее - биокомплексы).
Для анализа биологического материала на МЕ яды необходимо предварительно разрушить биокомплексы.
Минерализация – окисление орг веществ в обьекте анализа с целью разрушения биокомплексов и изолирования соединений МЕ.
Минерализацию делят на «сухую» и «мокрую», а ее методы - на общие и частные (изолирование соединений некоторых МЕ в небольшихнавесках обьектов).
К сухой минерализации относят сжигание, сплавление с содой и селитрой; к мокрой – жидкофазное окисление смесями кислот.
Совр варианты кислотных смесей:
1.Н2SO4 и НNO3
2. Н2SO4, НNO3 и HClO4
Оба метода быстрые, позволяют полностью разрушить биокомплексы и получить малые обьемы минерализатов. Недостатки: значительная потеря ртути(1,2) и взрывоопасность (2).
Минерализация смесью 1
Нагревают 100 г (как правило) биологического материала и 75 мл кислотной смеси. Функции кислотных ингредиентов реакц смеси:Н2SO4 конц -водоотнимающее средство и окислитель, НNO3 конц –окислитель.
При нагревании реакц смеси кислоты разлагаются с образованием соответствующих оксидов и азотистой кислоты (НNO2), которые являются сравнительно более сильными окислителями. Кроме того, образуется еще один окислитель - нитрозилсерная кислота (НО-SO2 –ONO).
При наличии в биологическом материале ароматических веществ происходят побочные процессы сульфирования и нитрования, которые затрудняют минерализацию. Для снижения роли этих процессов перед минерализацией возможно разбавление кислот, но не настолько значительное, чтобы они утратили окислительную способность.
Минерализация протекает в 2 стадии.
Стадия 1 - «деструкция» осуществляется при слабом нагревании. Происходит окисление аминокислот, пептидов и белков, в результате чего биокомплексы деструктирутся, а МЕ ионы переходят в раствор - деструктат.
Стадия 2 –осуществляется при более сильном нагревании и прикапывании доп количества НNO3. Происходит полное окисление всей органики в составе биологического материала, включая наиболее медленно реагирующие жиры (лимитирующая реакция) до простых неорганических веществ.
Анализу полученного минерализата на наличие МЕ ионов мешают остатки в нем НNO3 и НNO2 , окислов азота и нитрозилсерной кислоты. Процесс освобождения минерализата от этих азотсодержащих окислителей –денитрация.
Гидролизный. Разбавление минерализата водой с последующим нагреванием. В результате гидролиза нитрозилсерной кислоты образуются Н2SO4 и НNO2. При нагревания НNO2, а также НNO3 и оксиды азота улетучиваются. Метод длительный (10-17 час).
С использованием восстановителей (мочевина, сульфат натрия, формальдегид). Лучшим является НСНО, поскольку ок—восст процесс с его участием происходит быстро (1-2 мин), а избыток НСНО легко удаляется в течение нескольких мин.
Проверку полноты денитрации проводят по реакции с дифениламином. Реакц смесь не должна окрашиваться в синий цвет.
Анализ МЕ ионов в минерализате после денитрации осуществляют одним из методов:
· систематический ход анализа
· дробный метод.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.