Выполнение работы
1. Нанесение проб «свидетелей» и анализируемого раствора на пластину проводят с помощью стеклянных капилляров. При анализе таблетки препарата ее измельчают, добавляют ~1 мл C2H5OH и смесь переносят в бюкс. Нерастворившийся осадок представляет собой инертный наполнитель.
2. Хроматографирование проводят по методу восходящей хроматографии в камере, насыщенной растворителем, до тех пор, пока растворитель не поднимется примерно на 2/3 длины пластины.
3. Идентификацию компонентов проводят, рассматривая высушенную на воздухе пластинку в УФ-свете. Зоны обводят карандашом и рассчитывают значения Rf. Определяют качественный состав смеси и делают заключение о чистоте анализируемых препаратов.
Для успешного решения поставленной задачи необходимо тщательное выполнение эксперимента, так как при анализе лекарственных препаратов возможно большое различие в содержании компонентов и влияние этого фактора на значение Rf , кроме того, все разделяемые здесь компоненты не поглощают в видимой области спектра и не различимы по окраске. Поэтому рекомендуется провести разделение на нескольких пластинах с разными объемами проб (особенно для анализируемой смеси) и добиться хорошей воспроизводимости значений Rf.
Задания и вопросы
1. Составьте таблицу значений Rf анализируемых компонентов для разных опытов и оцените их воспроизводимость.
2. С одинаковой ли надежностью идентифицируются все компоненты? Какие дополнительные факторы можно использовать в случае «спорной» идентификации?
3. Какие функциональные группы, входящие в состав лекарственных веществ, обуславливают их взаимодействие с сорбентом?
4. Объясните наблюдаемую зависимость значений Rf от химического строения компонентов на примере метилированных производных ксантина:
Какие другие хроматографические методы применяются при анализе лекарственных препаратов?
5. Какие зоны компонентов можно использовать для оценки эффективности пластинки? Рассчитайте ВЭТТ.
Контрольные вопросы к разделу «Тонкослойная хроматография»
1. Какие сорбенты используются в ТСХ? Их классификация и основные свойства.
2. Какие взаимодействия определяют сорбцию на полярных и неполярных адсорбентах?
3. Дайте полную характеристику свойств одного из сорбентов, используемых в ТСХ.
4. Что такое модифицированные сорбенты? Какими способами их приготавливают?
5. Как изменение свойств силикагеля влияет на адсорбцию на нем?
6. Для каких целей используются сорбенты, пропитанные AgNO3?
7. Сравните методы ТСХ и БХ.
8. Какие функциональные группы органических соединений определяют сорбируемость их на полярных сорбентах?
9. Возможна ли абсолютная стандартизация условий хроматографического разделения в тонком слое?
10. Как оценить эффективность разделения в тонком слое?
11. Какие способы идентификации компонентов в методе ТСХ Вы знаете?
12. Каковы принципы количественного анализа в ТСХ?
13. Как взаимосвязаны колоночный и тонкослойный варианты хроматографии?
14. Приведите примеры изменения элюирующей способности растворителя в зависимости от состава.
15. Как связаны природа разделяемых компонентов и свойства сорбента с составом элюента?
16. Что такое высокоэффективная ТСХ? В чем особенность адсорбентов и аппаратуры, используемых для этого метода.
17. Сравните методы нисходящей, восходящей, двумерной, круговой хроматографии.
18. Какие механизмы разделения могут быть реализованы в БХ?
19. Что дает сочетание БХ и электрофореза?
20. Укажите все факторы, влияющие на значение Rf в методе ТСХ.
Рекомендуемая литература к практикуму «Хроматографические методы анализа»
Аналитическая химия
1. Аналитическая химия: проблемы и подходы: В 2 т. Пер. с англ. Под ред. Ю. А. Золотова. М.: Мир, АСТ, 2004.
2. Основы аналитической химии: В 2 т. / Ю. А. Золотов, Е. Н. Дорохова, В. И. Фадеева и др. М.: Высш. шк., 1987. Дрофа, 1999; 2000; 2002; 2004.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.