Серологический диагноз позволяет ретроспективно обосновать диагноз при стертых формах заболевания, а также выявить вид возбудителя дизентерии. В сыворотке крови больных определяют титр агглютининов в реакций агглютинаций с дизентерийным диагностикумом, содержащим взвесь дизентерийных микробов, убитых формалином. Диагностический тигр агглютининов 1:200,у детей, в связи с пониженной реактивностью, диагностический титр 1: 100, а у детей до 3 лет – 1:50. Кроме реакции агглютинации, антитела в сыворотке больных определяют в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с эритроцитарным диагностикумом. По результатам реакции выдается ответ, в котором отмечают положительный или отрицательный результат с каждым примененным антигеном, при положительной реакции указывается титр.
Серологическое исследование при дизентерии, вызванной палочками Ньюкасл, Бойда практически значения не имеет.
2. Изучение этапов бактериологического диагноза дизентерии.
2.1 Исследуемые испражнения высеять на среду Плоскирева по секторам. Для этого взять чашку со средой, дно расчертить на 4 сектора карандашом по стеклу, обозначить 1,2 и т.д. Стерильной петлей выбрать слизисто-гнойный комочек и нанести на поверхность среды в первом секторе. Взять стерильный шпатель, растереть внесенный материал в первом секторе с поверхности среды досуха, затем последовательно, не прожигая шпатель, сделать посев в остальных секторах. При переходе из сектора в сектор, шпатель от среды отрывать. Посевы поставить в термостат.
2.2 Изучить колонии, выросшие на среде Плоскирева. Для дальнейшего исследования отобрать бесцветные прозрачные колонии, они подозрительны на шигеллы. Часть подозрительных колоний пересеять на среду Олькеницкого. Посев делать петлей штрихами по скошенной поверхности среды, а потом уколом в глубину столбика. Посевы поставить в термостат.
2.3. Изучить посевы на среде Олькеницкого. Отбросить культуры, которые изменили среду Олькеницкого в синий цвет и в столбике, и на скошенной поверхности, как с образованием газа, так и без него (кишечная палочка). Отбросить так же пробирки с культурами, которые изменили цвет среды в оранжевый (протей).
Для дальнейшего исследования отобрать только те культуры, которые изменили цвет среды в столбике (ферментация глюкозы), а скошенная поверхность осталась неизменной. Эти культуры подозрительны на шигеллы.
С подозрительными на шигеллы культурами поставить реакцию агглютинации на стекле с видовым и типовым дизентерийными сыворотками.
Сначала поставить реакцию со смесью сывороток №1, которая содержит антитела к шигеллам Флекснера, Ньюкасл и Зонне. Для постановки реакции нанесите каплю сыворотки на предметное стекло, рядом для контроля- каплю физиологического раствора. В обе капли внести исследуемую культуру (начать с контроля) и размешать. При положительной реакции через несколько минут капля просветляется,
по периферии видны зерна агглютината. Если реакция отрицательная, то продолжить изучение антигенной структуры культуры со смесью №2.
Если реакция агглютинации со смесью №1 положительна, поставить реакцию агглютинации с каждой сывороткой, входящей в смесь. Для этого на предметное стекло нанести по капле сыворотки к шигеллам Флекснера, Ньюкасл и Зонне. В каплях размешать испытуемую культуру. Петлю прожигать после каждой сыворотки.
Через несколько минут в одной из сывороток происходит агглютинация, по виду сыворотки определить вид культуры. Если реакция положительна с сывороткой Зонне или Ньюкасл, выдать результат.
Если реакция положительна с сывороткой Флекснера, поставить реакцию агглютинации с групповыми сыворотками и определить групповые антигены, по которым определить серовар и подсеровар шигелл Флекснера, выдать ответ.
3. Изучить и зарисовать в тетради микроскопические препараты.
4. Изучить демонстрационный пестрый ряд, записать в тетрадь.
5. Изучить и записать в тетрадь препараты для специфической
профилактики и терапии дизентерии.
Литература
основная
1 Пяткин К.Д. Микробиология, I980
Кривошеин Ю.С.
2. Пяткин К.Д. Руководство кпрактическим занятиям по
Маркова Н.С. медицинской микробиологии. М.,19б9
Трофимова Н.Д.
3. Тимаков В.Д. Микробиология, 1983
Левашев В.С.
Борисов Л.Б.
4 . Руководстве к лабораторным занятиям по микробиологии . Под
ред.Л.Б.Борисова. М.,1979
5. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, иммунологии, вирусологии. Под ред.Зыкова М.П. М., 1977
дополнительная
6. Белозеров Е.С. Брюшной тиф и паратифы, 1978
Продолобов Н.В
7. Борисов Л.Б. Энтеропатогенные кишечные палочки и их фаги, 1978
8. Бургасов Н.Н. Холера Эль-Тор, 1976
9. Бруцеллез. Под ред. Вершиловой П.А.
10. Виноградов-Волжинский Д. Карантинные болезни,1975
Левитов Т.А.
11. Емельянов П.Я. Бактерии рода Шигелла и их идентификация, 1973
12.Красноголовец В.Н. Дисбактериоз кишечника, 1989
13. Мартиневский И.Л Биология и генетические особенности чумного и близкородственных к нему микробов, 1969
14. Олсуфьева Н.П. Таксономия, микробиология и лабораторная
диагностика возбудителя туляремии, 1975
15. Покровский В.Н. Дизентерия (шигеллезы), 1979
и др.
16.Руководство по зоонозам, 1983
17. Руководство по микробиологической диагностики инфекционных болезней. Под ред. Матвеева К.И. 1979
18. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов, 1975
19. Сибирская язва. Под ред. Гинсбурга Н.Н. 1975
20. Смирнова А.М. Микробиологические основы диагностики
Подлевский А.Ф. инфекционных заболеваний, 1979
21. Справочник по микробиологическим и вирусологическими методами исследования. Под ред. Биргера М.О. 1982
22.Стейнер Р., Мир микробов в 3-х томах. «Мир»,1979
Эдельберг Э.,
Ингрэм Дж.
23. Тимаков В.Д. Биологические и генетические характеристики
Петровская В.П бактерий рода шигелл, 1980
Бондаренко В.М.
24.Шляхов Э.Н. Иммунология, иммунодиагностика,
иммунопрофилактика инфекционных болезней
Кишинев. 1977
25. Джавец Э. Руководство по медицинской микробиологии в 3-х т
Мельник Дж. Л. 1982
Эйдельберг Э.А.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.