Возбудители особо опасных и зоонозных инфекций, энтеробактерий. Часть IV: Методические указания к практическим занятиям, страница 17

2. Рост тифозных и паратифозных бактерий

   На среде Эндо тифозные и паратифозные бактерии вырастают бесцветными. Среда Эндо относится к диффиринциально-диагностическим средам . В ее состав кроме питательной основы входят лактоза и индикатор- основной фуксин, обесцвеченный раствором сульфита натрия, образуется бесцветная фуксинсернистая кислота . Тифозные и паратифозные бактерии не сбраживают лактозу, поэтому среду Эндо не изменяют и колонии на среде вырастают бесцветными.

3. Биохимические изменения на пестром ряду с посевом тифозных и паратифозных бактерий .

Виды возбудителей						Образование
	Лактоза	Глюкоза	Мальтоза	Маннит	Сахароза		индола	H2S
S.typhi S. paratyphi A S. schottmuelleri	- - -	к кг кг	к кг кг	к кг кг	- - -		- - -	+ - +

В состав пестрых рядов входят пептонная вода, углевод (0,5- 1%) и индикатор бромкрезолпурпур. В среду опущен поплавок  для улавливания газа. При расщеплении углевода образуется кислота (к) и среда из фиолетовой становится  желтой или красной и газ (кг), среда не только изменяет цвет, но и в поплавке  накапливается газ. Для обнаружения сероводорода под пробку помещают фильтровальную бумажку, пропитанную уксусно-кислым свинцом. При положительной реакции на сероводород бумажка чернеет, так как образуется сернистый свинец. Для обнаружения индола используют бумажку, пропитанную щавелевой кислотой. Если при расщеплении пептона образуется индол , бумажка розовеет.

4.  Посев по методу Клодницкого

      Сделан посев 10 мл. крови в 100 мл. стерильной дистиллированной воды. В воде происходит гемолиз, образуется лаковая кровь, которая служит питательной средой для возбудителей, на ней тифозные бактерии вырастают не хуже, чем на среде с желчью.

5. Реакция непрямой Ви-гемагглютинации

Эта реакция используется для обнаружения Ви-антител как у больных людей, так и бактерионосителей. На  присутствие возбудителей брюшного тифа организм отвечает выработкой антител, в том числе Ви-антител, поэтому определение этих антител имеет большое эпидемиологическое значение, т.к. позволяет выявить бактерионосителей.

   На эритроциты человека или животных, обработанные специальным методом, адсорбирован Ви-антиген , и эти эритроциты приобретают способность агглютинироваться соответствующими Ви-антителами. Эритроциты с адсорбированными на их поверхности антигенами называет эритроцитарными диагностикумами. Ставят реакцию Ви-гемагглютинации в пробирках или в пластмассовых пластинах по схеме:

Разведение сыворотки Компоненты реакции, мл	1	2	3	4	5	6	7
	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	Контр. сыв-ки	Контр. антигена
Физ. раствор	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	-	0,5
Сыворотка больного 1:5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5 0,5 мл. в дез. рас-ре	0,5Ви сыв-ки	-
Эритроцитарный диагностикум	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25

Содержимое перемешивают и ставят в термостат на 2 часа и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Учитыва­ют с контроля. В контроле Ви-сыворотки реакция должна быть поло­жительной, в контроле диагностикума – отрицательной. Реакцию оценивают по степени агглютинации диагностикума :

++++   - эритроциты полностью агглютинированы, осадок на дне лун­ки       в виде зонтика

+++     - "зонтик" меньше, не все эритроциты агглютинировались

++     - "зонтик" маленький, на дне лунки осадок из неагглютинированных эритроцитов

 -           - реакция отрицательная, эритроциты не агглютинировались и    осели на дно лунки в виде пуговки.

6. Посев испражнений больного брюшным тифом на среде Эндо, Мюллера

а)   на среде Эндо выросли колонии кишечной палочки красного
цвета и среди них бесцветные колонки тифозных илипаратифозных
бактерий.

б)   посев на среду Мюллера (в пробирке) способствует подавлению
роста кишечных палочек и накоплению тифозных и паратифозных бак­терий, потому что среда Мюллера, кроме питательной основы (МПБ)
содержит раствор иода, гипосульфита натрия, химически чистого ме­ла. При взаимодействии этих веществ образуется тетратионат натрия_,
являющийся фактором, подавляющим рост кишечной палочки, но не
препятствующий росту и размножению тифозно-паратифозных бактерий.

Методические указания к практической работе

1.  Изучение лабораторного диагноза брюшного тифа и паратифов по таблице

Выделение возбудителя тифа и паратифов имеет важное диагнос­тическое и эпидемиологическое значение. Оно позволяет быстро гос­питализировать больного и провести необходимые мероприятия по предупреждению распространения инфекции. Определить вид возбуди­теля можно только при лабораторном исследовании,  так как по течению не всегда отличают брюшной тиф от паратифа А и В.  Еще большую роль играет лабораторная диагностика   при стертых и атипических формах болезни.

Основными методами лабораторного исследования являются :

бактериологический

серологический

Нередко только бактериологическое обследование позволяет с высокой степенью достоверности поставить точный диагноз заболевания, уста­новить источники инфекций и факторы её передачи.

Выбор исследуемого материала зависит от стадии патогенеза брюш­ного тифа.

Исследуемый материал    и методы диагностики тифа

и паратифов в зависимости от патогенеза