9) воронки стеклянные;
10) колбы мерные объемом 50 мл;
11) колбы конические объемом 200 мл;
12) пипетки градуированные объемом 1 и 10 мл;
13) бюретка для титрования;
14) цилиндр мерный объемом 10 мл;
15) фотоэлектроколориметр;
16) термостат;
17) баня водяная;
18) растворы ингибиторов.
Ход работы
Для исследования действия одного ингибитора требуется по 6 конических колб объемом по 200 мл, в которые вносят по 50 мл раствора белкового субстрата и по 5мл раствора фермента. После чего в колбы приливают 0,1% раствор ингибитора и дистиллированную воду в количествах, указанных в таблице 2. Затем все колбы направляют на термостатирование при 45º С в течение 60 минут.
После окончания термостатирования колбы прогревают на кипящей водяной бане 10 минут для прекращения реакции ферментативного гидролиза. Содержимое колб фильтруют через бумажный фильтр и охлаждают до комнатной температуры. Полученный фильтрат направляют на определение азота формольно-титруемых аминогрупп по методу Черногорцева или калориметрическое определение относительного количества продуктов гидролиза модифицированным методом Лоури.
Таблица 2
Номер колбы |
Вносимое количество дистиллиров. воды, мл |
Вносимое количест-во раствора NаЭДТА, мл |
Номер колбы |
Вносимое колво дистилли-рованной воды, мл |
Вносимое количество раствора NаЭДТА, мл |
1 |
10 |
0 |
4 |
6,0 |
4 |
2 |
9,0 |
1 |
5 |
4,0 |
6 |
3 |
8,0 |
2 |
6 |
0 |
10 |
6. ПЕРЕЧЕНЬ РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Дроздов Н.С., Матеранская Н.П. Практикум по биологической химии. - М.:Высшая школа, 1970 г.
2. Збарский И.Б., Иванов И.И.,Мардашев С.Р. Биологическая химия.-Л.: Медицина, 1972 г.
3. Ленинджер А. Биохимия.- М.:, Мир, 1974 г.
4. Малер Г., Кордес Ю. Основы биологической химии.-М.: Мир, 1970 г.
5. Мальком Лав. Химическая биология рыб.-М.: Пищевая промышлен ность, 1976 г.
6. Кизеветтер И.В. Биохимия сырья водного происхождения.-М.:, Пищевая промышленность, 1973 г.
7. Кучеренко Н.Е. и др. Биохимия. Практикум. - Киев.: Выща школа,1988 г.
8. Рис Э., Стербент М. От клеток к атомам. Иллюстрированное введение в молекулярную биологию. - М.: Мир, 1988 г.
9. Сорвачев К.Ф. Биологическая химия. -М.: Просвещение, 1971г.
10. Фердман Д.Л. Биохимия. -М.: Высшая школа, 1966 г.
11. Филиппович Ю.Б. и др. Основы биохимии.-М.:,Высшая школа, 1968 г.
12. Штауб Ф.Б. Биохимия. - Будапешт, Fdojt,1965 г. (рус. язык).
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.