У всех больных исследования проводились при поступлении в реанимационное отделение до начала интенсивной терапии и перед переводом в профильное отделение.
Содержание ДК в плазме крови определяли по методу В.Б.Гаврилова и М.И.Мишкорудной (1983), после экстракции смесью гептана и зопропанола (1:1) в гептановой фазе на спектрофотометре при длине волны 232 нм. При расчёте использовали коэффициент молярной экстинции равной 2,2 х 105 м-1 х см-1. Единицы измерения мкмоль/мл. Содержание МДА в плазме крови определяли в реакции с тиобарбитуровой кислотой по методу Э.Н.Коробейниковой (1989). С целью избежания примесей нелипидной природы пробы спектрофотометрировали при 2-х длинах волн: 532 нм и 580 нм. При расчёте использовали коэффициент молярной экстинции, равной 1,56 моль-1 х см-1, единицы измерения нмоль/мл.
ДК в эритроцитах определяли по методу В.Н.Ушкаловой и Н.Д.Кадочниковой (1987), после его экстракции смесью гептано-изопропилового спирта, в гептановой фазе на спектрофотометре при длине волны 232 нм и результат выражался в Е232мл/эр. Для определения ШО в мембранах эритроцитов использовали методический подход, предложенный Е.И.Львовской и соавт. (1981). Для этой цели гексановый экстракт спектрофотометрировали при длинах волн: 220 нм и 400 нм и соотношение Е400/Е220 соответствовало уровню ШО в мембранах эритроцитов, единицы измерения условные. Содержание МДА в эритроцитах определяли по методу М.С.Гончаренко и А.М.Латиповой (1985) в реакции с тиобарбитуровой кислотой, пробы спектрофотометрировали при длине волны 532 нм, при расчёте использовали коэффициент молярности 1,56 х 105 моль-1 х см-1, результаты выражали в мкмоль/мл. эр.
О состоянии АОЗ в плазме крови судили по активности КТ и определяли в реакции с перекисью водорода по методу Aebi H. (1968), пробы спектрофотометрировали, за единицу активности каталазы принята скорость диспропорционирования Н2О2 при 240 нм в сек-1 х 10-3.
Система антирадикальной и антиперекисной защиты оценивалась в эритроцитах по активности СОД, ГПО и КТ. СОД определяли по методу Е.В.Макаренко (1988) в реакции с нитросиним тетразолем и фенозинметасульфатом в присутствии НАДФ.Н, пробы спектрофотометрировали при длине волны 540 нм и выражали в условных единицах/мл. х эр. х мин. Активность КТ в эритроцитах определяли по методу М.А.Королюка и соавт. (1988) в модификации Л.Е.Муравлевой и Б.С. Черкешевой (1991), в реакции с перекисью водорода и молибдатом аммония, пробы спектрофотометрировали при длине волны 410 нм, при расчёте учитывали коэффициент молярной экстинции равной 22,2 х 103 моль-1 х см-1. Единицы измерения нм Н2О2/мл. эр. мин. Активность ГПО в эритроцитах определяли по методу С.И.Власовой и соавт. (1990) в реакции с восстановленным глутатионом, спектрофотометрировали при длине волны 260 нм и выражали в ед. опт. пл. /мл. эр./мин.
Кроме методов оценки системы ПОЛ-АОЗ, проводилось определение средних молекул (СМ) в эритроцитах, так как основная часть циркулирующих в крови СМ связана с мембранами эритроцитов. Уровень СМ служит одним из показателей степени интоксикации. Содержание СМ в эритроцитах определяли по методу А.Н.Ковалевского и О.Е.Нифантьева (1989) спектрофотометрически и выражали в условных единицах.
Контрольную группу составили 30 здоровых детей аналогичных возрастных групп.
Результаты лабораторного исследования, а также выраженность и продолжительность клинических параметров обработаны стандартными методами вариационной статистики с оценкой достоверности по критерию Стьюдента. Расчёты проводили на компьютере IBM РС Celeron c помощью пакета программ MS Excel 97, базировавшихся на общепринятых методах группировки и сравнения лабораторных и клинических данных (Л.С. Каминский, 1964; Ю.С. Малета, В.В. Тарасов, 1981).
Настоящая работа представлена двумя разделами: экспериментальным и клиническим.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.