Противомикробная терапия синдрома системного воспалительного ответа при некоторых инфекционных заболеваниях у детей (Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук), страница 4

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Настоящая работа представлена двумя разделами: экспериментальным и клиническим.

 Материалы и объекты исследования

  Объект исследования в эксперименте

В качестве экспериментальных животных использовали 170 белых беспородных мышей-самцов массой 18-20 г, 36 лягушек, общая длина 13-17 см, длина тела 6-8 см. Все животные получены из питомника Карагандинской государственной медицинской академии, где содержались в стандартных условиях. В работе использовали клинические изоляты Salmonella typhimurium тип А, Shigella flexneri тип 6, гепаринизированную плазму больного ребёнка с синдромом системного воспалительного ответа (СВО), развившимся на фоне сепсиса смешанной этиологии.

Использовались следующие антибактериальные препараты:

1.  Гентамицина сульфат (Россия);

2.  Доксициклин (Россия);

3.  Левомицетина сукцинат (Россия);

4.  Полимиксин-М-сульфат (Россия);

5.  Рифампицин (Россия);

6.  Спирамицин (ровамицин) (Франция);

7.  Ципрофлоксацин (ципролет) (Индия).

        Объект исследования в клинике

Характеристика обследованных больных

Работа проводилась на базе Областной инфекционной клинической больницы (ОИКБ) г. Караганды. Под наблюдением находился 171 ребёнок с инфекционными заболеваниями различной этиологии, поступивший в реанимационное отделение ОИКБ, с установленным диагнозом СВО на основании нижеописанных критериев. Возраст наблюдавшихся детей был от 7 дней до 13 лет. Распределение по полу было следующим: мальчиков 118, девочек 53. Группу сравнения составили 32 ребёнка, поступивших в реанимационное отделение ОИКБ по поводу тяжёлого течения различных инфекционных заболеваний, но без признаков СВО. Группу контроля составили 30 практически здоровых детей аналогичных возрастных групп.

 Объект лабораторных исследований

Объектом исследования послужила кровь (плазма, эритроциты и иммунокомпетентные клетки: лимфоциты, моноциты, нейтрофилы) детей, больных инфекционными заболеваниями различной этиологии с диагностированным СВО, которая забиралась до и после проведения курса антибактериальной терапии. Кровь для исследования брали одновременно на все показатели, что обеспечивало сопоставимость полученных результатов.

Методы исследования

 Методы исследования в эксперименте

Сравнительное изучение антитоксических свойств антибактериальных препаратов в эксперименте на модели острого эндотоксикоза

Острый эндотоксикоз моделировали посредством внутрибрюшинного введения под эфирным наркозом белым мышам термолизата клинических изолятов Salmonella typhimurium тип А и Shigella flexneri тип 6, полученного путём кипячения на водяной бане смыва с 24-часовой агаровой культуры сальмонелл либо шигелл, стандартизированного по мутности (около 10⁶ микробных клеток в 1 мл). Стерильность термолизата контролировали путём отсева на плотные питательные среды. Всего в опыте было взято 170 самцов беспородных белых мышей. Контролем служили животные, которым внутрибрюшинно вводили смыв стерильным 0,85% раствором хлорида натрия с плотной питательной среды (агар-агар).

Детоксицирующие свойства препаратов  в опытах in vitro изучали в реакции нейтрализации токсина. Для этого смесь исследуемого препарата с дозой токсина (термолизат сальмонелл или шигелл), вызывавшей 100%-ную гибель животных, инкубировали при температуре 37^оС в течение 60 минут с последующим внутрибрюшинным введением белым мышам. Результаты оценивали по выживаемости животных через 24 и 48 часов.

Проводилось сравнительное изучение детоксицирующих свойств антибактериальных препаратов, характеризующихся высокой проникающей способностью внутрь клеток организма (доксициклин, левомицетин-сукцинат, рифампицин, спирамицин, ципрофлоксацин) по сравнению с антибиотиками, не проникающими внутрь клеток – гентамицин, полимиксин-М-сульфат – последний по данным литературы, мог обладать антитоксическими свойствами.