Лягушку обездвиживали (после предварительной декапитации), вскрывали грудную клетку, обнажали сердце, удаляли сердечную сорочку и подсчитывали частоту сердечных сокращений до и после воздействия 10 каплями «суммарного токсина» (гепаринизированная плазма больного ребёнка с СВО). Разница в числе сокращений, выраженная в процентах, отражала степень токсичности исследуемой биологической жидкости (индекс интоксикации).
Детоксицирующее действие антибактериальных препаратов (спирамицин, рифампицин, ципрофлоксацин, левомицетин-сукцинат) оценивали в реакции нейтрализации токсина. Для этого исследуемый препарат инкубировали при температуре 37оС в течение 60 минут с гепаринизированной плазмой больного ребёнка с последующим определением индекса интоксикации по вышеописанной методике. Контролем служила гепаринизированная плазма здорового донора (группа контроля).
Клиническое обследование больных проводилось по общепринятой методике с заполнением специально разработанной карты, которая включала в себя данные тщательно собранного анамнеза, объективного обследования больных и лабораторных методов. У всех больных при поступлении в отделение и в динамике заболевания проводилось клиническое наблюдение с учётом выраженности симптомов интоксикации, обезвоживания, частоты и характера стула. Проводились общепринятые лабораторные исследования (ОАК, ОАМ, микроскопическое и бактериологическое исследование кала). По показаниям проводились биохимические анализы (определение содержания электролитов в плазме крови, параметров свёртывающей системы крови, исследование общего белка и белковых фракций). При подозрении на пневмонию проводилась рентгенография органов грудной клетки. При наличии сопутствующих заболеваний назначались консультации невропатолога, оториноларинголога, хирурга и др.
Иммунологические методы
Методы идентификации Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций
Количество Т-лимфоцитов определяли по Jondal et al. (1972) с учётом рекомендаций Pang et al.(1974), с дополнениями Р.В.Петрова и соавт.(1976). Количество Т-супрессоров определяли по методу Moretta et al.(1977) в модификации Ф.Ю.Гариба и М.В.Залалиевой (1981), а Т-хелперов по Moretta et al.(1977). Количество В-лимфоцитов определяли по методу Mendez et al. (1972) с дополнениями Р.В.Петрова и соавт.(1976). Число нулевых 0-лимфоцитов определялось путём вычитания суммы Т- и В-клеток от общего числа лимфоцитов.
Исследование функциональной активности нейтрофилов крови
Исследование функциональной активности нейтрофилов крови проводили в реакции образования диформазана из нитросинего тетразолия активированными нейтрофилами крови (спонтанный НСТ-тест – R.Baechner, D.Nathan, 1968; B.Park, 1971). Результат выражался в процентах диформазан-положительных клеток на 100 нейтрофилов.
Для определения функционального резерва нейтрофилов использовали индуцированный зимозаном (полисахаридный комплекс из пекарских дрожжей – 50 мкг/мл) НСТ-тест.
Контролем служили данные, полученные при обследовании 30 практически здоровых детей.
Для решения поставленных задач, наряду с общепринятыми методами клинического и лабораторного исследования, был применён комплекс специальных методов для оценки системы окислительного метаболизма, позволяющих определить интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), состояние антирадикальной и антиперекисной защиты (АОЗ), оценить в целом степень мембранопатологических процессов в организме обследуемых детей и 30 детей здорового контроля.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.