Белки системы комплемента: свойства и биологическая активность, страница 7

может приводить к последующей активации компонентов ком­племента, образованию мембраноатакующего комплекса и лизису собственных клеток. Угнетение фиксации СЗ-конвертаз на мем­бране аутологичных клеток и расщепление иммобилизованных конвертаз на предшествующие субкомпоненты (С4Ь и С2а в случае СЗ-конвертаз классического и СЗЬ и Bb — в случае аль­тернативного пути активации комплемента) осуществляются с помощью особого белка, получившего название DAF (англ. De­cay-accelerating factor, разрушение ускоряющий фактор). DAF является гликопротеином с мол. массой 70 кД и как мембранно-связанный белок представлен почти на всех клетках крови (эрит­роциты, гранулоциты, Т- и В-лимфоциты, моноциты, тромбо­циты), а также на эпителиальных клетках разных органов, эн-дотелиальных клетках сосудов и т. д. Отсутствует DAF на мем­бранах МК-клеток. В крови и моче также определяли раство­римые формы DAF-белка. DAF-белок не только препятствует образованию альтернативной и классической СЗ-конвертазы на поверхности собственных клеток, но и обеспечивает диссоциа­цию уже сформированного на мембране мультимолекулярного комплекса СЗ-конвертазы на отдельные молекулы. Имеются дан­ные, что DAF подавляет также образование Сз-конвертаз (C4b2a3b и СЗЬВЬЗЬ). DAF-белок фиксируется на клетке через гликофосфоинозитоловую связь с фосфолипидами мембраны клетки. Генетические нарушения синтеза фосфоинозитола лиша­ют клетки возможности фиксировать на своей мембране DAF и CD59 и делают их весьма чувствительными к лизису аутологич-ным С'. Таков, например, патогенез пароксизмальной ночной ге-моглобинурии, когда эритроциты больных не защищены от дей­ствия аутологичного комплемента с помощью DAF и CD59. В плазме крови содержится еще один регулятор классического пу­ти активации комплемента, ускоряющий расщепление С4Ь2а-комплекса (классическая СЗ-конвертаза) и в качестве кофактора участвующий в опосредуемом фактором I разрушении С4Ь. Этот белок плазмы получил обозначение C4bp (С4 binding protein, англ. С4Ь-связывающий белок). Белок состоит из 7 идентич­ных полипептидных цепей, гликозилирован и имеет мол. мас­су 500 кД. Синтез C4bp осуществляется гепатоцитами.

Ингибиторами альтернативного пути активации белков системы комплемента выступают факторы Н и 1. Фактор I яв­ляется двуцепочечным гликопротеином с мол. массой 100 кД,

дпппойщ.т п ганестпе протеаэи расщеплять, как С'?Ь. так и С4Ь на более мелкие субкомпоненты. Для проявления своей ак­тивности фактор I нуждается в кофакторах, которыми являются циркулирующие в крови фактор Н и C4bp, а также фиксиро­ванные на мембране клеток рецепторы к СЗЬ, iC3b и С4Ь (CR1, CD35) или МСР (мембранный кофактор, CD46). Циркули­рующий в крови фактор Н конкурирует с фактором В за СЗЬ. В образующемся растворимом комплексе СЗЬН фактор I расщеп­ляет а-цепь СЗЬ и превращает его в инактивированный iC3b, а затем, вероятно с участием протеаз плазмы крови и катепсинов, последовательно расщепляет этот компонент комплемента на все более мелкие субкомпоненты (C3dg, СЗс, C3d, C3g, СЗе). Основ­ным источником фактора I являются гепатоциты и в меньшей степени — мононуклеарные фагоциты. Фактор Н плазмы кро­ви является р-глобулином с мол. массой 150 кД, состоит из одной полипептидной цепочки и содержит до 10% углеводов. Фактор I может ингибировать и расщеплять и фиксированный на клетке СЗЬ, но в этом случае в качестве кофакторов выступа­ют ассоциированные с мембраной клетки CR1 или МСР. Рас­щепляя циркулирующий или иммобилизованный С4Ь, фактор I участвует также в регуляции классического пути активации С'.

Подавление активности мембраноатакующего комплекса С' осуществляется с помощью S-белка, называемого также витро-нектином. S-белок взаимодействует с находящимися в жидкой

фазе С5Ь67 и, не подавляя последующее присоединение к это­му комплексу С8 и С9, препятствует погружению образовав­шегося МАК в липидную мембрану клетки и таким образом предотвращает лизис клетки.

Известно, что эритроциты, гомологичные МАК-образую-щим компонентам комплемента, отличаются устойчивостью к

комплемснтзависимому цитолизу. Было показано, что -^та ус­тойчивость эритроцитов обязана белкам, способным подавлять образование МАК из гомологичных эритроцитам компонентов комплемента. Эти ограничивающие гомологичный гемолиз бел­ки получили название факторов гомологичной рестрикции (англ. homologous restriction factor, HRF). В настоящее время охарактеризованы по крайней мере два таких фактора.

Первый из них, с мол. массой 65 кД, был выделен солюби-лизацией мембран эритроцитов человека и оказался способным взаимодействовать с С8 человека, препятствуя присоединению С9 к комплексу С5Ь678.

Второй белок, ингибирующий процесс образования МАК, был изолирован из обработанных папаином эритроцитов челове­ка. Молекулярная масса этого белка 18—20 кД, а белок был обо­значен как HRF-18(20), или CD59. CD59 оказался достаточно широко распространенным в тканях и определялся не только на эритроцитах, но и на мембранах Т- и В-лимфоцитов, моноцитов,

КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 7, 2000

У фактора В и С2 высокая гомология аминокислотной после­довательности молекул, а также в организации и локализации генов, контролирующих эти белки.

Механизмы и продукты активации комплемента классиче­ским и альтернативным способами тесно взаимодействуют и до­полняют друг друга. Так, молекулы СЗЬ, фиксирующиеся на мембране клеток и инициирующие альтернативный путь акти­вации комплемента, могут образовываться в результате расщеп­ления СЗ с помощью мультимолекулярного комплекса С4Ь2а, который является СЗ-конвертазой классического пути актива­ции комплемента.

При попадании инфекционных агентов в организм альтер­нативный путь активации комплемента, по-видимому, вклю­чается раньше классического, поскольку он может иницииро­ваться в результате прямого взаимодействия СЗ и его субкомпо­нентов с микроорганизмами и их продуктами. Однако наличие даже у неиммунных индивидуумов так называемых естествен­ных или нормальных антител позволяет системе комплемента при первичном контакте организма с чужеродными агентами активироваться и классическим способом.

Филогенетически альтернативный путь активации компле­мента более древний, чем классический, поскольку иммуногло-булины надежно определяются у круглоротых рыб, а подобные комплементу белки — в ликворе у более низкоорганизованных биологических объектов.