Исследование системы комплемента включает определение в сыворотке крови содержания отдельных белков и оценку их индивидуальной функциональной активности и активности всей системы в целом. При определении содержания в крови белков комплемента используются иммунохимические методы анализа, в которых применяются моно- или поликлональные иммунные сыворотки против отдельных белков системы. Содержание тех или иных компонентов комплемента определяют в опытах "ракетного" иммуноэлектрофореза, радиальной иммунодиффузии, количественной иммунонефелометрии, иммуноферментного и имму-нофлюорссиентного анализа. Цитоиммунофлюоресцентные мето-
дики используются при исследовании содержания на клетках отдельных белков комплемента, рецепторов к ним и иммобилизованных ингибиторов комплемента. В настоящее время имеются иммунные сыворотки против всех компонентов комплемента, основных регуляторных белков и некоторых субкомпонентов классического и альтернативного путей активации комплемента.
Функциональная активность системы комплемента оценивается в реакции гемолиза сенсибилизированных антителами эритроцитов. Для количественной характеристики активности комплемента предложено гемолитическую активность комплемента выражать в единицах 50% гемолиза. За единицу 50% гемолиза (СН50) принимают количество комплемента, обеспечивающего лизис 50% сенсибилизированных эритроцитов во взвеси клеток определенных густоты и объема. Исследование гемоли-тической активности комплемента достаточно надежно характеризует функцию системы комплемента в целом. Снижение гемо-литической активности комплемента у больных может быть связано с накоплением в крови у обследуемых иммунных комплексов антиген—антитело, снижением синтеза или возросшим катаболизмом отдельных компонентов системы и, наконец, повышенным синтезом растворимых ингибиторов комплемента. Иногда на фоне нормального содержания в крови белков комплемента функциональная активность системы может быть снижена в связи с изменениями у больных в структурных генах соответствующих компонентов комплемента. Для выявления таких поломок приходится использовать реакцию гемолиза, восполняя при этом комплемент в сыворотке обследуемых функционально полноценными индивидуальными компонентами комплемента.
В качестве реагентов для выявления функциональной активности отдельных компонентов С'используются также сыворотки лиц с генетическим дефицитом определенных белков С'. В опытах иммунного гемолиза in vitro сыворотка обследуемого восполняет отсутствующий в генетически дефицитной сыворотке компонент комплемента.
О 4:>ункциональной активности белков классического и альтернативного путей активации комплемента удается также судить косвенно, выявляя в обследуемой сыворотке содержание таких продуктов активации С', как С3с1 (классический путь активации) или Ва (альтернативный путь активации).
Вопросы для самоконтроля
1. Каковы основные механизмы активации белков системы комплемента?
2. Какие из продуктов активации системы комплемента характеризуются как анафилатоксины?
3. Какие из компонентов комплемента участвуют в лизисе кле-ток-мишеией (образование мембранодтакующего комплекса)?
4. Какие белки осуществляют регуляцию активации белков системы комплемента?
5. Какой мммунобиологической функцией обладают белки системы комплемента?
6. В чем заключается эффскторная активность белков системы комплемента?
7. В чем заключается регуляторная функция белков системы комплемента?
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
1. Долгов В. В., Шевченко О. П. Лабораторная диагностика нарушения обмена белков. — М., 1997.
2. Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. Л. Йеге-ра: Пер. с нем. — М., 1990. — Т. 1.
3. Ярилин А. А. Основы иммунологии. — М., 1999.
4. Campbell R. D., Law S. K., Reid К. В., Sim R. B. // Ann.Rev. Im-munol. — 1988. — Vol. 6. — P. 161—195.
5. Carroll М. С. I/ Ibid. — 1998. — Vol. 16. — P. 545—568.
6. Sliles D. P., Ten- A. 1., Parslow T. G. Medical Immunology. — Connecticut, 1997.
Поступила 28.02.2000
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 7, 2000
клеток. Поэтому эти субкомпоненты комплемента являются
эндогенными опсонинами, усиливающими захват и завершенность фагоцитоза в отношении объектов, несущих на себе соответствующие молекулы комплемента.
Рецепторы к СЗЬ (CR-1) имеют и эритроциты человека, которые фиксируют на себе мультимолекулярные иммунные комплексы (в том числе и комплексы аутоантигенов и аутоан-тител) и обеспечивают их транспортировку из тканей и удаление из циркуляции в селезенке и синусоидах печени.
С Is, СЗа, С4а и С5а обладают способностью активировать тучные клетки и базофилы, вызывая их дегрануляцию и активацию синтеза и секрецию разнообразных медиаторов аллергического воспаления. СЗа и С5а вызывают также сокращение гладкой мускулатуры и повышают проницаемость сосудистой стенки. Такая иммунобиологическая активность СЗа- и С5а-субкомпо-
нентов комплемента позволила их называть анафилатоксинами.
Рецепторы к некоторым субкомпонентам комплемента имеют дендритные клетки селезенки и лимфоузлов, В-лимфо-циты, некоторые субпопуляции Т-лимфоцитов и NK-клетки. Благодаря этим рецепторам осуществляется длительное депонирование комплексов антиген—комплемент в дендритных клетках и активное взаимодействие этих антигенпредставляющих клеток и В-лимфоцитов. Такое взаимодействие усиливает пролиферацию антигенспецифических В-лимфоцитов и активную их диффе-ренцировку в малые долгоживущие В-лимфоциты — носители иммунологической памяти. Сигналы, подаваемые лимфоцитам через CR-1-рецепторы, способны также выступать в качестве костимулов при IL-2-зависимой пролиферации лимфоцитов.
CR-3- и С I q- R-рецепторы выявлены у NK-клеток, и воз-
действие на эти клетки соответствующих лигандов обеспечивает активацию и усиление цитотоксичности МК-клеток.
Исследования характера воспаления и продукции антител у линейных животных с генетическими дефектами белков системы С' подтвердили данные об участии различных субкомпонентов С' в воспалительных реакциях и в иммунном ответе организма.
У людей врожденные или приобретенные дефекты синтеза отдельных компонентов С'проявляются высокой чувствительно-
стью к пиогенным и "капсульным" инфекциям, склонностью к
развитию аутоиммунных заболеваний (табл. 4). Повышенная активность комплемента, связанная, например, с наследственным
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.