Клиническое и прогностическое значение биологических факторов опухолевого роста при неходжкинских лимфомах, страница 8

Таким образом, цитокины и интерфероны, проявляющие плейотропные биологические эффекты, в некоторых случаях обладают выраженным противоопухолевым действием, однако при определенных условиях могут способствовать прогрессированию ряда злокачественных опухолей, в том числе лимфопролиферативной природы. В последние годы сформировалось представление, что цитокины не играют ключевой роли на первых этапах опухолевой трансформации, однако пролиферация, некроз или апоптоз клеток злокачественного клона могут быть связаны с действием цитокинов, в том числе ИФН и ФНО-a. Кроме того, изучаемые цитокины являются мощнейшим активатором иммунокомпетентных клеток в процессе элиминации злокачественного клона. Различные аспекты участия этих цитокинов в патогенезе НЛ позволяют использовать их в качестве прогностических факторов и средств мониторинга течения заболевания.

Таким образом, исследуемые цитокины являются важными биологическими маркерами как в противоопухолевых иммунных реакциях, так и в регуляции направления злокачественной трансформации (совместно с другими факторами) при НЛ. В такой ситуации чрезвычайно затруднены однозначные оценки изменения их концентрации и продукции иммунокомпетентными клетками. Следовательно, настоящее исследование, проводимое с целью определения патогенетической, диагностической и прогностической роли ИФН и цитокинов, является необходимым этапом в изучении цитокинового статуса больных НЛ для дальнейшей разработки патогенетически обоснованных эффективных программ терапии, включающих иммуномодуляторы, цитокины или антицитокиновые препараты.

Список использованной литературы:

1.  Серебряная Н.Б., Мазуров В.И., Новик А.А. и др. Клиническое значение иммунологических нарушений у больных злокачественными неходжкинскими лимфомами // Экспериментальная онкология. –1996. –№ 4-6. –С. 69-72.

2.  Шаманский С.В. Диагностическое и прогностическое значение сывороточного ИЛ-6 у больных острыми лейкозами и неходжкинскими лимфомами: Автореф….дисс. канд. мед. наук. –СПб., –1997. –20 с.

3.  Coiffer B., Gisselbrecht C., Vose J.M. Prognostic factors in aggressive malignant lymphomas: description and validaton of an index that could identify patients requiring a more intensive therapy // J.Clin.Oncol.- 1991.- №9.-  P.211-219.

Приложение1

МЕТОД ИНДУКЦИИ СИНТЕЗА ЦИТОКИНОВ КЛЕТКАМИ

ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

Реактивы и оборудование:

Среда Игла (ФС 42-50 ВС-87)

Глютамин "SERVA", Германия

Гентамицин (ФС 42-2628-89)

Фитогемагглютинин "SERVA"

Гепарин (Р.70.367.19) Минмедбиопром

Продигиазан (Р.70.156.3) Минмедбопром

Чашки Петри диаметром 40 мм "Медполимер", Россия

Пробирки на 15 мл.

Планшеты для культивирования клеток 96- луночные

Пипетки автоматические с переменным объемом

С0₂ -инкубатор

Стерилизующие нитроцеллюлезные фильтры с размером пор 0,22 мкм

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРА ГЛЮТАМИНА

Делаем навеску глютамина - 3,0 грамма, растворяем в 100 мл. дистиллированной воды. Полученный раствор стерилизуем фильтрованием через нитроцеллюлозный фильтр. Раствор разливаем по 5,0 мл. в стерильные пенициллиновые флаконы. Раствор хранится до употребления в холодильнике при температуре -20°С.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ СРЕДЫ

К 500,0 мл. среды Игла добавляем 5,0 мл. 3% раствора глютамина и 40 мг гентамицина. Приготовленная среда хранится в холодильнике при +4°С в течении двух месяцев.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАТОЧНОГО РАСТВОРА ФИТОГЕМАГГЛЮТИНИНА

Взвешиваем на аналитических весах стерильный пенициллиновый флакон закрытый резиновой пробкой. В боксе стерильно добавляем во флакон порошок фитогемагглютинина. Флакон вновь закрываем и взвешиваем.  К взвешенному количеству фитогемагглютинина добавляем такое количество Среды Игла, чтобы   концентрация раствора составляла 1,0 мг/мл. Раствор хранится в холодильнике при +4 С в течении трех месяцев.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ФИТОГЕМАГГЛЮТИНИНА

К 1,8 миллилитра среды Игла добавляем двести микролитров маточного раствора фитогемаглютинина. Таким образом мы получаем раствор в котором каждые 100 мкл содержат 10,0 мкг фитогемаглютинина, что является оптимальной дозой для стимуляции продукции интерлейкина -2.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ПРОДИГИОЗАНА