Возбудители особо опасных и зоонозных инфекций, энтеробактерий. Часть IV: Методические указания к практическим занятиям, страница 8

 б.  Противосибиреязвенный иммуноглобулин.

Препарат представляет собой гамма-глобулиновую фракцию сыво­ротки крови лошадей, гипериммунизированных живой сибиреязвенной

вакциной и вирулентным штаммом бацилл. Препарат обладает защитны­ми и антитоксическими свойствами, вводят его внутримышечно для экстренной профилактики и лечения сибирской язвы, после определе­ния чувствительности к лошадиному белку.

Экстренную профилактику проводят при возникновений очага сибирской язвы людям, которые ухаживали за больными животными, принимали участие при их захоронении;  людям, которые употребляли мясо больных животных; а также людям, тесно контактировавшим с больным сибирской язвой человеком (общая постель, полотенце).

Введение иммуноглобулина с лечебной целью применяют в сочета­нии с другими методами лечения.

7. Антраксин

Антраксин - аллерген, представляет собой белково-полисахарид-но-нукяеиновый комплекс, извлеченный при гидролизе сибиреязвенных бацилл, после предварительной термической денатурации балластных белков.  Применяется для постановки кожно-аллергической пробы   в диагностике сибирской язвы.

Методические указания к практической

работе

1. Изучение микробиологического диагноза сибирской язвы по схеме

Лабораторное исследование при сибирской язве применяют в медицинской практике для прижизненной или посмертной диагности­ки болезни у человека,  для установления ретроспективного диагно­за, определения иммунного состояния,  идентификации палочек сибир­ской язвы, определения степени загрязненности внешней среды, сырья животного происхождения спорами сибиреязвенных бацилл.

В целях прижизненной лабораторной диагностики сибирской язвы у человека используют:

1. Микроскопический метод

2. Бактериологический метод

3. Биологический метод

4. Аллергический метод

При определении обсемененности объектов внешней среды и загрязненности сырья животного происхождения применяют сероло­гические исследования.

Основным и наиболее достоверным методом диагностики сибир­ской язвы является выделение и идентификация культуры возбудите­ля от больного. Работа с возбудителем    сибирской язвы проводится в строго режимных условиях, которые   предупреждают возможность заражения персонала и обсеменения спорами возбудителя окружающей среды. Так как споры бацилл высоко устойчивы к физическим факто­рам, используют методы обеззараживания, обеспечивающие гибель спор (трупы животных сжигают, исследуемый материал и выделенные культуры автоклавируют при 126°С 2 часа. Стеклянную посуду,  ха­латы, поверхности столов  обрабатывают 4% раствором хлорамина в течение 3 часов).

Выбор исследуемого материала зависит от клинической формы сибирской язвы.

При кожной форме болезни исследуют содержимое карбункулов, отделяемое язвы или отторгнутый струп. Перед взятием материала кожу и поверхность карбункула очищают,  содержимое берут стерильной пипеткой, шприцем или тампоном.

При подозрении на легочную форму исследуют мокроту, которую собирают в широкогорлые стерильные банки.

При кишечной форме на исследование берут испражнения и мочу  (1-2 л) в стерильные банки.

При генерализованной форме исследуют кровь, которую берут в объеме 3-5 мл стерильным шприцем из локтевой вены и тут же у постели больного засевают в МПБ.

Материал тщательно упаковывают, укладывают в ящик, который пломбируют или опечатывают сургучом, на крышке делают надпись «Верх,  осторожно!» и немедленно направляют в лабораторию с на­рочным.

Микроскопический метод

Этот метод  диагностики имеет ориентировочное значение, так как он не позволяет надежно отдифференцировать сибиреязвенные бациллы от других спорообразующих бацилл, крайне широко распространенных во внешней среде. Из доставленного материала готовят мазки,  окрашивают по Граму и другими анилиновыми краси­телями, а также одним из специальных  методов для выявления кап­сулы. Наличие в мазках грамположительных палочек, располагающих­ся единично, попарно, а также в виде обрубленных нитей с просветлениямимежду отдельными палочками, заключенных в  общую капсулу, дает основание выдать ориентировочный предварительный ответ.

Результативности исследования может быть повышена при ис­пользовании люминесцентной микроскопии. В этом случаеприготовленные мазки обрабатывают иммунными флюоресцирующими сыворотка­ми. При просмотре окрашенных мазков в ультрафиолетовых лучах

видны палочки, окруженные ободком, светящимся зеленоватым светом.

Бактериологический метод

Бактериологический метод основан на выделении чистой культу­ры сибиреязвенных бацилл на питательных средах и её идентификации от похожих спорообразующих бацилл обитающих во внешней среде. Бактериологическое исследование позволяет поставить окончатель­ный диагноз.

Возбудитель сибирской язвы хорошо растет на простых пита­тельных средах. Исследуемый материал засевают на МПА и МПБ. Посе­вы инкубируют в термостате при 36-37°С. После суточного инкубиро­вания   изучают рост на плотной и жидкой среде. Для выявления кап-сулосбразования применяют посевы на среды с 40 % сывороткой.

Рост культуры сибиреязвенных бацилл на бульоне очень харак­терен :  бульон остается прозрачным, а культура вырастает у дна в виде комочка ваты, который с трудом разбивается при встряхива­нии. На МПА образуются характерные серебристо-серые колонии, плоские с неровным краем, который под малым увеличением имеет вид переплетенных нитей – «локонов». Из бульонной и агаровой культур готовят мазки, в которых обнаруживают бескапсульные бациллы,  расположенные, особенно в бульонных культурах, в виде длинных цепочек и нитей. В мазках из агаровых культур могут быть обнаружены споры. В мазках культур из сывороточных сред при спе­циальной окраска можно обнаружить капсулу. Из колоний выделяют культуру сибиреязвенных бацилл, которую идентифицируют и диффе­ренцируют с похожими  бациллами по следующим тестам:

а)   подвижность, которую изучают в «висячей» капле или путем по­сева в 0,3% МПА. У сибиреязвенных бацилл подвижность всегда от­сутствует, в то время как большинство молодых сапрофитных бацилл
подвижны.