При положительной реакции агглютинации оставшуюся часть колоний отсеять на скошенный агар или среду Олькеницкого. Если же ни одной из десяти колоний не дала агглютинации, выдать отрицательный ответ.
3 день
2.3. Изучить посевы на скошенном агаре и среде Олькеницкого.
2.4. Поставить ориентировочную реакцию агглютинации на стекле с поливалентной сывороткой. Если реакция агглютинации положительна, поставить реакцию агглютинации на стекле с каждой типовой сывороткой, входящей в поливалентную.
2.5. Подтвердить принадлежность выделенной культуры к эшерихиям. Для этого изучить ферментативные свойства, сделав посев на жидкие среды Гисса с лактозой, глюкозой, маннитом, сахарозой, мальтозой. Сделать также посев на МПБ для определения образования индола и сероводорода.
2.6. Провести окончательную серологическую идентификацию культуры. Для этого поставить развернутую реакцию агглютинации с живой и гретой культурой.
Диагностическую типовую сыворотку разводят от 1:100 до титра сыворотки, указанного на этикетке. Из разведений приготовить два ряда пробирок. Приготовить антиген. Для этого смыть культуру с поверхности среды 3-5 мл физиологического раствора, разлить взвесь в 2 стерильные пробирки. Одну из них прогреть на водяной бане при 100°С в течение часа. 6 первый ряд разведений сыворотки внести по 2 капли живой культуры, во второй - по 2 капки гретой культуры. После встряхивания пробирки поместить в термостат на 18-20 часов.
4день
Учет результатов
Заключение по исследованию
2.7. Просмотреть посевы на пестром ряду. Для кишечной палочки характерна ферментация лактозы, глюкозы, мальтозы и маннита с образованием кислоты и газа, отсутствие ферментации, сахарозы, образование индола. Учет реакции агглютинации провести с помощью лупы. Агглютинация с живой культурой крупнохлопчатая (Н-агглютинация), с убитой - мелкозернистая (О-агглютинация).
Учет реакций агглютинации:
|
Культура |
Разведения сыворотки |
Контроль сыворотки |
|||||
|
1:100 |
1:200 |
1:400 |
1:800 |
1:1600 |
1:3200 |
||
|
Живая культура Гретая культура |
++++ ++++ |
++++ ++++ |
++++ ++++ |
+ ++++ |
- +++ |
- ++ |
- - |
Реакция считается положительной, если агглютинация с гретой культурой отмечается в разведении сыворотки не ниже половины титра сыворотки, а с живой не менее, чем 1:200. Если реакция положительна, то выдают ответ в следующей формулировке "Выделена патогенная кишечная палочка серовара..." Если реакция отрицательная, то выдают ответ «Патогенные кишечные палочки не выделены».
3. Изучить микроскопические препараты, зарисовать.
4. Описать в тетради характер роста кишечной палочки на среде Эндо
5. Изучить и описать в тетради препараты для специфического лечения острых кишечных инфекций и дисбактериоза .
Кишечный фаг
Кишечный фаг представляет собой фильтрат фаголизата энтеропатогенных кишечных палочек. Содержит корпускулы фага активные в отношении кишечных палочек серотипов 0III, 055, 026, 0I25 и др.
Применяется для лечения кишечных инфекций, вызванных кишечной палочкой. Используют его местно в виде орошений, примочек, парентерально (подкожно или внутримышечно).
Колибактерин
Колибактерин представляет coбой препарат, содержащий живые антагонистически активные в отношении шигелл Зонне и Флекснера штаммы кишечной палочки M-I7.
Колибактерин применяют через рот для лечения хронических колитов, дисбактериоза, для долечивания реконвалесцентов после дизентерии детей старше 6 мес. и взрослых.
Бифидумбактерин
Бифидумбактерин представляет собой препарат, содержащий высушенную взвесь живых бифидобактерий. Препарат применяют через рот для лечения детей и взрослых. Особенно показан для лечения детей первого года жизни. Показания к применению те же, что и у предыдущего препарата.
Лактобактерин
Лактобактерин представляет собой препарат, содержащий высушенную взвесь живых антагонистически активных лактобактерий. Лактобактерин применяют через рот, назначают для лечения детей с первого полугодия и взрослых при состояниях, сопровождающихся дефицитом лактобактерий в микрофлоре кишечника.
Бификол
Бификол представляет собой комплексный препарат, содержащий высушенную взвесь антагонистически активных бифидобактерий и кишечных палочек М-17. Показания к применению те же, что у предыдущих препаратов. Назначают для лечения через рот детям старше 6 мес. и взрослым людям.
:Тема: Сальмонеллы. Морфология, биология, культуральные, биохимичес-
кие и антигенные свойства сальмонеллы брюшного тифа, сальмонеллы паратифа А и сальмонеллы паратифа В. Патогенез брюшного тифа и паратифов. Метод гемокультуры. Серологический диагноз брюшного тифа - реакция Видаля. Выделение культуры возбудителя из испражнений, мочи, дуоденального содержимого. Специфическая профилактика брюшного тифа и паратифов
Цель занятия : Ознакомить студентов с биологической характеристикой сальмонелл, рассмотреть патогенез брюшного тифа, отметить зависимость выбора метода диагностики от фазы патогенеза, изучить бактериологический и серологический методы диагностики, препараты для специфической профилактики и лечения брюшного тифа и паратифа.
Методические указания к демонстрации
1. Мазки из чистых культур сальмонелл, окрашены по Граму.
а) мазок из чистой культуры сальмонелл брюшного тифа, окрашенный по Граму. В мазке из чистой культуры видны прямые с закругленными концами грамотрицательные палочки, расположенные беспорядочно.
б) мазок из чистой культуры сальмонелл паратифа А . В мазке видны прямые грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, бессистемно.
в) мазок из чистой культуры сальмонелл Шоттмюллера. В мазке из чистой культуры сальмонелл паратифа В, окрашенных по Граму, видны прямые, с закругленными концами грамотрицательные палочки, расположенные бессистемно.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.