|
Период болезни |
Фаза патогенеза |
Материал для исследования |
Метод исследования |
|
Первая неделя болезни |
Бактериемия |
Кровь |
Гемокультура |
|
Вторая неделя болезни |
Паренхиматозной диффузии |
Кровь Сыворотка испражнения |
Гемокультура Реакция Видаля Копрокультура |
|
Третья неделя болезни |
Выделительно-аллергическая |
Кровь Испражнения Моча Желчь Сыворотка |
Гемокультура Копрокультура Уринокультура Культура из желчи Реакция Видаля |
|
Четвертая неделя болезни |
реконвалесценция |
Желчь Испражнения Моча сыворотка |
Культура из желчи Копрокультура Уринокультура Реакция Видаля |
Указанные сроки представляют схематическое обобщение и могут колебаться в каждом индивидуальном случае в зависимости от тяжести болезни, возникновения рецидивов. Обнаружение возбудителя брюшного тифа и паратифов в крови всегда является показателем.
острого заболевания. У здоровых людей или людей выздоровевших микробы в крови не циркулируют. Обнаружение возбудителей тифа и паратифов в желчи, моче или испражнениях служит свидетельством или острого заболевания, или показателем временного или хронического бактерионосительства.
Выделение чистой культуры проводят по одной и той же схеме, не зависимо от вида доставленного материала. Различия заключаются лишь в способе забора материала и выборе сред для первичного посева.
а) метод гемокультуры (выделение культуры возбудителя из крови больного) является методом ранней диагностики, так как возбудителя можно выделить из крови с первого дня болезни.
Кровь для исследования берут стерильным шприцом из локтевой вены и засевают на одну из накопительных сред сразу у постели больного. Кровь берут на высоте лихорадочного периода в объеме 10 мл., при понижении температуры количество бактерий в крови уменьшается, поэтому объем крови для исследования увеличивают (объем определяют так: неделя болезни умноженная на 10 мл.). Чтобы избежать действия бактерицидных веществ и антител крови на бактерии, ее разводят питательной средой в соотношении 1:10. Для посева используют жидкие питательные среды с желчью, так как в ее присутствии тифозные и паратифозные бактерии размножаются быстро, кроме того желчь нейтрализует действие антител, что также способствует размножению бактерий.
б) метод копрокультуры (выделение возбудителя из испражнений)
Пробы испражнений следует отбирать из последней , более жидкой порции (из верхних отделов кишечника), непосредственно после дефекации. Их собирают стерильным деревянным шпателем или стерильной стеклянной палочкой из судна, обработанного кипяченой водой в широкие короткие пробирки. Посев испражнений производят двумя способами –прямым- на агар Эндо или Плоскирева и на среды обогащения
в) метод уринокультуры (выделение возбудителя из мочи)
Мочу в количестве 20-25 мл. собирают в стерильную посуду с соблюдением правил, исключающих внесения посторонней флоры и доставляют в лабораторию. Перед посевом мочу центрифугируют и осадок засевают в среду обогащения и на плотные дифференциальные среды.
г) метод дуоденокультуры (выделение культуры из дуоденального содержимого)
Зондирование производят тонким зондом.
Натощак забирают две
(А и В) или три порции (А, В и С) в стерильные пробирки.
Посев
можно сделать из каждой порции или предварительно их
смешать и
посеять смесь. .
Этапы выделения гемокультуры I день
10-20 мл стерильно взятой из локтевой вены крови засевают на 100-200 мл 10% желчного бульона или среды Рапопорт. Среда Рапопорт позволяет уже на второй день дифференцировать тифозные бактерии от паратифозных. Паратифозные бактерии разлагают глюкозу, входящую в состав среды Рапопорт с образованием кислоты и газа, которые обнаруживают при помощи «поплавков» . Тифозные бактерии разлагают глюкозу только до кислоты.
Кровь можно засевать в желчь, при отсутствия желчи посев делают на дистиллированную воду. Посев помещают в термостат при 37°С на сутки.
2 день
Через сутки можно наблюдать рост бактерий, что проявится в помутнении среды, на стенках и на дне колбы лежит грязновато-белый осадок. Делают первый высев на одну из дифференциально-диагностических сред : Эндо, Левина и др. независимо от видимых проявлений роста. Посев делают петлей штрихами. Посевы ставят в термостат на сутки.
Если результат будет отрицательный, через двое суток делают второй высев. При отрицательном результате третий высев можно сделать на 5-7 или 10 день. Отсутствие роста после седьмого дня позволяет дать отрицательный ответ.
3 день
На среде Эндо вырастает колонии, которые просматривают невооруженным глазом и при помощи лупы. Возбудители брюшного тифа образуют на среде Эндо круглые уплощенные бесцветные слегка мутные колонии. Несколько подозрительных колония (5-6) выделяют на среду Олькеницкого (скошенный столбик с лактозой, глюкозой, сахарозой и мочевиной) или Росселя (с лактозой и глюкозой). Посев производят следующим образом : снятую колонию осторожно, не задевая края про-
бирки, вносят в конденсационную жидкость, штрихами засевают всю окошенную поверхность, затем у основания "косяка" делают укол в глубину столбика. Пробирки с посевами ставят в термостат.
4 день
Просматривают посевы и отбирают для дальнейшего исследования те из них, которые не разлагают лактозу и мочевину в течение первых суток. Если среди выделенных культур все расщепляют лактозу или мочевину, то исследование прекращают и выдают отрицательный результат.
Таким образом, для дальнейшего исследования отбирают культуры, которые ферментируют глюкозу до кислоты или кислоты и газа.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.