Исследование воздействия физических и химических факторов на концентрацию Hb в водном растворе и цельной крови, страница 17

Исходя из того, что наиболее вероятной причиной была реассоциация CO с образованием HbCO, в качестве вещества, способного предупреждать этот феномен гемопротеида и лиганда был выбран гипохлорит натрия, изменяющий, согласно литературным данным (58, 67, 69), доступность альтернативного лиганда кислорода.

Действительно, добавление 0,06 % раствора гипохлорита натрия в кювету, содержащую 10 мл цельной крови крыс приводило к достоверному снижению концентрации карбоксигемоглобина в крови. Измерения концентрации карбоксигемоглобина в экспериментах с добавлением гипохлорита натрия проводились в образцах, подвергшихся 5, 10, 15, 20, 25, 30, и 45 минутному воздействию NaClO. При воздействии гипохлорита натрия в течение 5 минут снижение концентрации карбоксигемоглобина было незначительным, но возрастало по мере увеличения времени воздействия NaClO. Максимальное снижение концентрации карбоксигемоглобина наблюдалось в образцах, подвергшихся воздействию гипохлорита натрия в течение 30 минут. В течение последующих 15 минут достоверного изменения концентрации карбоксигемоглобина не происходило (Табл. 3).

Таблица 3.

Изменение концентрации карбоксигемоглобина в крови крыс при воздействии гипохлорита натрия в экспериментах in vitro

Время воздействия (мин)

Концентрация HbСО(%)

0

46,85 ± 2,31

5

45,01 ± 1,25 *

10

43,58 ± 1,37 *

15

42,64 ± 1,08 *

20

41,74 ± 1,72 °

25

41,24 ± 1,04 **

30

40,45 ± 1,19 **

45

40,17 ± 1,12 **

Примечание: Достоверность отличий от 0 минут (0).

Известно, что комбинированное воздействие ряда факторов физической и химической природы может значительно отличаться от эффектов их изолированного применения (86, 88, 105).

При комбинированном действии излучения Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм и плотностью мощности 200 мВт/см2 и 0,06% раствора гипохлорита натрия на цельную кровь реакция фотодиссоциации приобретала необратимый характер (Табл. 4). При этом раствор гипохлорита натрия добавляли в кювету с исследуемым образцом крови одновременно с началом действия лазера.

Снижение концентрации карбоксигемоглобина за те же периоды времени было более значительным. Максимальное снижение концентрации карбоксигемоглобина наблюдалось при сочетанном действии фотолизирующего излучения и гипохлорита натрия в течение 30 минут. В течение последующих 15 минут достоверного изменения концентрации карбоксигемоглобина не происходило (Табл. 4).

Таблица 4

Изменение концентрации карбоксигемоглобина в крови белых крыс–самцов, подвергнутых воздействию 0,2% CO в течение 10 минут (t=31°C, in vitro) при сочетанном действии 2-гармоники Nd-YAG лазера(l 533 нм) и 0,06 % раствора NaClO

Время воздействия (мин)

Концентрация HbCO(%)

0

46,85±2,31

5

41,58±1,27 *

10

38,12±1,33 *

15

36,76±1,78 **

20

35,18±1,44 ***

25

34,58±1,34 ***

30

33,35±1,63 ***

45

33,19± 1,57 ***

Примечание: Достоверность отличий от 0 минут (0).

Таким образом, в экспериментах по изучению оптического воздействия на гемопротеиды, проведенных с использованием цельной крови выяснилось, что изолированное действие излучения 2-ой гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм и плотностью мощности 200 мВт/см2 не приводит к достоверному снижению концентрации карбоксигемоглобина вследствие обратимости реакции фотодиссоциации – спонтанной реассоциации лиганда с гемопротеидом в межимпульсный период.

3.5. Действие лазерного излучения и раствора гипохлорита натрия на карбоксигемоглобин крови в экспериментах in vivo

В условиях живого организма кинетика межмолекулярных взаимодействий в системе «гемоглобин - лиганд» (кислород или угарный газ) может быть значительно изменена в результате действия «фоновых» факторов, таких как процессы газообмена, циркуляция крови и др. (96, 160, 119, 73).