Внутрикожно вводят шприцем не более 0.1 мл раствора в одно место через тонкую иглу.
При заражении в коготь кератин размягчают онихолизином и делают в нем глубокий разрез, в который помещают комочек культуры гриба, разрез закрывают коллодием; или размягчают коготь сернистым натрием, на ложе когтя наносят культуру и фиксируют ее с помощью лейкопластыря, которым «наматывают сапожок». Результат оценивают по характеру выделенной культуры (ретрокультуры), данным вскрытия, гистологического исследования патологического материала на наличие гриба и клеточной реакции организма.
С помощью аллергических проб, серологических и иммуно-клеточных реакций можно выявить изменения общей и специфической иммунной реактивности, возникающие в организме в процессе течения микоза, а при висцеральных поражениях - часто и диагностировать заболевание.
Серологические исследования при любом инфекционном заболевании, включая и микозы, преследуют следующие цели:
1) определение иммунной перестройки организма и обнаружение в сыворотках крови больного соответствующих антител;
2) обнаружение в крови антигенов и
3) серологическую характеристику выделенных возбудителей.
Для подтверждения этиологической роли того или иного гриба методом серологических реакций нужны повторные исследования, изучение динамики титров исследуемых сывороток, для чего каждая реакция должна ставиться с использованием в восходящих разведениях сыворотки и необходимых для оценки специфичности контролей.
Нарастание титра антител всегда свидетельствует об активной реакции организма в отношении предполагаемого возбудителя болезни, что особенно важно для диагностики инфекционных заболеваний.
Непременным компонентом всех серологических реакций является испытуемая сыворотка. Кровь для исследования берется натощак или через 5-6 часов после еды. У взрослого человека кровь получают шприцем из локтевой вены в количестве 5-7 мл в сухую стерильную пробирку, которую затем помещают на 1 час в термостат при 37°.
Образовавшийся сгусток крови отслаивают от стенок пробирки стеклянной палочкой или прокаленной бактериологической петлей и пробирка на сутки помещается для лучшего формирования сгустка в рефрижератор при температуре + 4, +5°.
На следующий день прозрачную сыворотку осторожно отсасывают пипеткой и переносят в другую пробирку так, чтобы в сыворотку не попали эритроциты.
Полученную сыворотку инактивируют прогреванием в водяной бане в течение 30 минут при 56° для разрушения комплемента и для понижения степени дисперсности белков.
Для приготовления антигенных препаратов используют вирулентные свежевыделенные штаммы грибов, которые считаются наиболее полноценными по антигенному составу. Для получения биомассы грибы выращивают в жидкой или на плотной среде Сабуро во флаконах или матрацах. Предварительно готовят густую взвесь клеток в изотоническом растворе или в жидкой среде. В матрац, содержащий 200 мл питательной среды, вносят около 5 мл взвеси, посевы инкубируют в термостате. Для получения антигенных препаратов биомассу собирают раньше, чем прекратится рост гриба. Длительное культивирование приводит к накоплению хламидоспор, появлению различных включений в клетках, что ведет к снижению специфичности препаратов. Можно выращивать грибы на целлофане, находящемся на поверхности питательной среды. Считают, что в этом случае гриб адсорбирует меньше балластных веществ из среды и лучше спорулирует.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.