Биохимия фактора IX и молекулярной биологии гемофилии B

Биохимия Фактора IX и Молекулярной биологии Гемофилии B

Стивен А. Лиментани и Брюс Фури

Введение

Фактор IX - плазменный белок с молекулярной массой 56,000, чей синтез печенью требует витамина K. Фактор IX участвует в промежуточной фазе тропы коагуляции крови (см. Ch. 100). Это может быть активизировано фактором XIa или фактором VIIa complexed с фактором ткани. В комплексе с фактором VIIIa на мембранных поверхностях, фактор IXa тогда активизирует фактор X. Критическая важность фактора IX подчеркнута фенотипом гемофилии B, наследственная болезнь, характеризованная фактором IX дефицит.

В 1952 фактор IX был обнаружен, отличным от фактора VIII, в этом после смешивания двух больного гемофилией plasmas от несвязанных пациентов, время свертывания крови смешанной плазмы было исправлено. 1,2 Гемофилия B, или Рождественская болезнь, является сцепленным с полом беспорядком, определенным врожденным уменьшением в факторе IX деятельность. Молекулярный дефект, причиняющий фактор IX дефицит в пациенте индекса недавно показался, чтобы быть точковой мутацией, причиняющей изменение(замену) от Cys 206 к serine в каталитической области. MLID92311856 3 Гемофилия B составляет(объясняет) приблизительно 12 % полных случаев(дел) гемофилии. Болезнь переменная в фенотипе, и градус(степень) выделяющейся серьезности обычно коррелирует с уровнем фактора IX подарок(настоящее) деятельности в плазме пациента. Как предполагалось от переменных фенотипов гемофилии B и подобия фенотипов в пределах каждого специфического семейства, гемофилия B вызвана разнообразием генетических дефектов. Оценено, что третья часть(треть) случаев(дел) гемофилии B является результатом спонтанных мутаций.

Структура Гена и Регулирование

Фактор IX ген - 34 КБ в размере, но только ограниченное количество этого DNA кодирует фактор IX белок. Ген содержит семь introns что диапазон в размере от 188 нуклеотидов до почти 10 КБ. MLID86000558 4 ген расположен на наконечнике(чаевых) длинной руки X хромосомы в Xq26-27.3, близко к фактору VIII ген. MLID84119514 5 cDNA состоит из 2.8 КБ - открытая рамка считывания, кодирующая для 461-амино кислотного белка предшественника. MLID82272386 MLID83065193 6,7 белок кодируется все восемь exons (рис. 107-1). Первый, exon 1, закодирует для пептида сигнала. Второй, exon 2, коды для propeptide и g-carboxyglutamic кислотной области фактора IX. Exon 3 кода для ароматической области стека аминокислоты, короткое соединение сегментирует обычный к всему витамину белки K-зависимых. Exons 4 и 5, отделенный большим intron, каждый код для двух эпидермального фактора роста (EGF) подобные области фактора IX. Exon 6 кодов для области активации фактора IX, в то время как exons 7 и 8 кода для каталитического (serine protease) область. Фактор IX ген был получен наследствено от предшественника гена протромбина. MLID85270390 8 гены для фактора VII, фактор X, и белок C разделяют общий(обычный), соединяют переходы с геном для фактора IX, демонстрируя близкие отношения витамина белки K-зависимых.

Регулирование фактора IX ген включает элементы гена - усилителя и androgen-чувствительную область(регион). TATA коробки были предложены в -27, MLID84236100 9 -187, MLID90216746 10 -265, MLID86000558 11 и -411. MLID86000558 11 CAAT коробка расположена в -238. MLID90216746 10 местообитание инициирования транскрипции было определено в +1 MLID84236100 9 и местообитание начала транскрипции в -150. MLID90216746 10 Reijnen и другие., MLID91032015 12 распространения затравки использования и картирование нуклеазы СИ, подтвердили возможные местообитания инициирования транскрипции в +1, +4, и +30, но были неспособен демонстрировать местообитание инициирования транскрипции в -150. Обратное направление покровитель-подобная деятельность было идентифицировано в области(регионе) между -800 и -750. MLID90216746 10 глушитель был идентифицирован между -1,600 и -1,900 и может лежать в -1,680 с последовательностью CCTCTCCTA. MLID90216746 10

Фактор IX Leyden - форма гемофилии B характеризованный серьезным беспорядком отбора конденсатных фракций в течение детства; фактор IX деятельность и уровни антигенов - < 1 %. 13 С началом половой зрелости или с администрацией androgen терапии, MLID85249674 14 фактор IX повышение уровней к 30-60 % нормальных, и фенотипу гемофилии исчезает (рис. 107-2). Мутации в генах пациентов в различных родословных с фактором IX Leyden фенотип расположены в -21, -20, -6, +6, +8, и +13 из местообитания начала транскрипции. MLID93313191 MLID88327116 MLID91167254 MLID89135004 15-19 дополнительная точковая мутация, причиняющая умеренную гемофилию была описана в 3-летнем пациенте в -5; последствие этой мутации в течение юности пока еще неизвестно. MLID92128980 20 точковые мутации, которые являются основанием для гемофилии B Leyden,  служили, чтобы увеличить понимание из 5 ' регулирующая область(регион) фактора IX ген. Обязательное местообитание для CCAAT/ENHANCER обязательный белок (C/EBP) между +1 и +18 было идентифицировано. MLID90259094 21 C/EBP закрепление ампутируется мутацией в +13, и белковом выражении,  уменьшен на мутацию в -6. Кроме того, обязательное местообитание для ядерного фактора -1 печень было определено между -76 и -99. MLID90259094 21 мутация в -20, -21, или -26 вела к идентификации обязательного местообитания для печеночного ядерного фактора -4 (HNF-4) между -10 и -34. MLID93313191 MLID92335285 MLID92335882 15,22,23 В отличие от фактора IX Leyden фенотип, мутация в -26 делает не свинец к исправлению фактора IX уровни после половой зрелости MLID92335882 23; androgen-чувствительный элемент расположен между -20 и -36. В нормальных индивидуумах, фактор IX выравнивает увеличение от 80 U/dl к 99 U/dl после половой зрелости, изменение(замена), которое является статистически существенным. MLID93311342 24