Биохимия фактора IX и молекулярной биологии гемофилии B, страница 7

Фактор IX активизирован фактором XIa в реакции, которая является независимой от мембранных поверхностей. На  норма(разряд) фактора IX активация не воздействует закрепление фактора XIa к тромбоцитам. MLID86243664 106

Формирование Tenase Комплекса

Закрепление фактора IXa к фактору VIII изучилось, используя, и porcine и человеческий фактор VIII. Использование анизотропии флюоресценции, чтобы контролировать взаимодействие porcine фактора VIIIa и фактора IXa derivatized с флуоресцентным ярлыком в пределах его активного местообитания, Duffy и другие. MLID92381007 107 показали, что эти белки взаимодействуют на поверхностях мембраны фосфолипида с Kd 2 nM в 1:1 молярная стехиометрия. Фактор IXa активное местообитание отличен от мембранной поверхности, и ее структура встревожена на взаимодействии с фактором VIIIa в течение формирования tenase комплекса. MLID92381008 108 Активации фактора IX к фактору IXa ведет к выражению фактора местообитание VIII-ЗАКРЕПЛЕНИЯ и активное местообитание фермента с полной деятельностью коагулянта. 109 Взаимно, активация фактора VIII тромбином выдает(уступает) фактор VIIIa, который связывает более сильно чем фактор VIII к фактору IXa. MLID92381007 107 Дробления Arg 180-Val 181 требуется для по крайней мере частичного выражения фактора VIII обязательное местообитание; дробление Arg 145-Ala 146 в дополнение к Arg 180-Val 181 ведет к полному ферментативному и кофактор обязательную деятельность. 109

Закрепление фактора IXa, фактор VIIIa, и фосфолипид (tenase комплекс) (рис. 107-5) исследовалось с химерными белками, в которых первые и вторые EGF области фактора X заменены на родные области в факторе IX. химеры, в которых в  секунду EGF область фактора IX был заменен с секундой EGF, область фактора X не связывает знаменательно в tenase комплексе, но взаимодействует обычно с фосфолипидом. 71 химера, в которой первая EGF область фактора IX была заменена с первой EGF областью фактора X, имеет полный или почти полную биологическую деятельность, указывая, что первая EGF область не вовлечена в фактор VIIIa закрепление. MLID90094389 71,72 Кроме того, эта форма связывает в tenase комплексе. 71 Это обнаружение говорит, что в  секунду EGF область фактора IX требуется для ферментативной деятельности и что это содержит местообитание признания для фактора VIIIa. 71

Активация Фактора IX Свойственной Тропой

Фактор IX - профермент без каталитической деятельности, которая активизирована к фактору IXa фактором XIa или фактором VIIa и фактором ткани в реакции, которая зависит от присутствия кальция (рис. 107-6). Кинетика фактора IX активация фактором VIIa и фактором ткани или фактором XIa сопоставима. Фактор IX преобразован(конвертирован) к его форме фермента, фактор IXa, фактором XIa. Эта реакция требует ионов кальция, но имеет место в растворе(решении). В отличие от другого витамина белки свертывания крови K-зависимых, мембранные поверхности, включая пузырьки фосфолипида или поверхности ячейки, не увеличивают фактор IX активация. Активация фактора IX фактором XIa - неправильно медленно в факторе IX Новый Лондон (Про 50 B Glu). MLID90167273 110 Это вовлекает EGF область в факторе IX активация. Когда фактор IX активизирован фактором XIa, две пептидных связи расщеплены: Одно соединение расположено в Arg 145-Ala 146, и другое соединение в Arg 180-Val 181 MLID78194509 MLID78130043 111,112 (рис. 107-7). Фактор IX сначала расщеплен к видовому числу IXa, в котором Arg-Ala сцепляются в остатках 145-146,  расщеплен сопровождаемым дроблением соединения Arg-Val в 180-181 остатках. MLID84000424 113 С выпуском внутреннего богатого углеводами фрагмента активации (Г. 11,000), от остатков 146-180, фактор IXa легкая цепь (Г. 17,000) и тяжелая цепь (Г. 28,000) остается связанным единственным(отдельным) соединением disulfide. Фермент активное местообитание расположен на тяжелой цепи. Фактор IXa произведенный этой реакцией - обозначенный фактор IXab.