Антитела к кор Антигену вируса гепатита С (мышиные моноклональные)

АНТИТЕЛА К КОР АНТИГЕНУ ВИРУСА ГЕПАТИТА С (МЫШИШЫЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ) ИФА ТЕСТ СИСТЕМА

ORTHOÒ АНТИТЕЛА К КОР АНТИГЕНУ ВИРУСА ГЕПАТИТА С HCVКор Антиген ИФА ТЕСТ СИТЕМА

Иммуноферментный анализ для определения кор антигена вируса гепатита С (HCV кор антиген) в плазме или сыворотке человека

Название и назначение метода

ORTHOâ Антитела к кор Антигену HCV ИФА - качественный и количественный иммунологический метод для определения нуклеокапсидного кор антигена вируса гепатита С (HCV кор антиген) в плазме или сыворотки человека. Он может быть использован как скрининговый метод для доноров крови, а так же в качестве вспомогательного при ранней диагностике инфекции вирусным гепатитом С.

Предназначение метода

ORTHOâ Антитела к кор Антигену HCV ИФА – ферментативный, иммуносорбционный анализ, содержащий в себе различные моноклональные антитела с разной специфичностью к отдельным регионам кор антигена HCV. Моноклональные антитела иммобилизованы в твёрдой фазе, покрывающей планшету с микролунками, а моноклональные антитела, конъюгированные ферментом пероксидаза хрена, определяют словленный антиген. Суть метода в том, что разбавитель образцов содержит детергент, и для определения кор антигена не требуется преинкубационного шага.

Вирус гепатита С (HCV) известен как причина, вызывающая передающиеся через кровь не-А, не-В гепатиты (неАнеВ). HCV передается через контаминированные кровь и её продукты. Скрининг, проводимый для определения антител к HCV (анти-HCV) у доноров крови помогает снизить риск развития посттрансфузионной инфекции HCV. Однако в данном случае можно столкнуться с задержками сероконверсии в течение нескольких месяцев. И в результате, мы имеем дело с очень низким, но существенным риском посттрансфузионной инфекции HCV от доноров, чья кровь была собрана в так называемый ‘период окна’ инфекции.

Недавние исследования показывают возможность определять нуклеокапсидный кор антиген HCV в период ‘окна’ в пре-сероконвесивных случаях. Любой образец, давший первичноположительный результат методом ORTHOâ Антитела к кор Антигену HCV ИФА должен быть повторно проверен этой же методикой (ORTHOâ Антитела к кор Антигену HCV ИФА). Наличие положительных результатов в обоих случаях говорит с высокой степенью о присутствии инфекции вирусным гепатитом С у лиц с повышенным риском. Для более точного решения этой проблемы рекомендуется провести исследование таких образцов методом ORTHOâ Антитела к кор Антигену HCV ИФА Подтверждающий Тест, или другим альтернативным методом. Для интерпретации подтверждающих результатов смотрите вложенную инструкцию в эти наборы.

Принципы постановки

Метод состоит из трёх этапов с использованием микровелл, покрытых моноклональными антителами, узнающими кор антиген HCV.

На первом этапе, разбавленный образец сыворотки или плазмы инкубируют определенное количество времени. Добавление разбавителя к образцам приводит к изменению цвета с зеленого на синий. Если антигены реагируют с какими - либо антителами на микропланшете, то комплексы антиген-антитело иммобилизуются на планшете, покрывая ее поверхность. Если антиген HCV в пробе не присутствует, то комплексы не будут формироваться. В последующей процедуре отмывки несвязавшиеся компоненты сыворотки или плазмы удаляются.

На втором этапе, конъюгат мышиных моноклональных антител, конъюгированный с ферментом пероксидазы хрена добавляется в микролунки. Конъюгаты связываются с комплексами антиген-антитело. Если этого комплекса нет, несвязанные конъюгаты удаляются последующей промывкой.

На третьем этапе, система определения фермента, состоящая из о-фенилендиамина (ОФД) и перекиси водорода вносится в микролунку. При наличии конъюгатов, ОФД окисляется, образуя при этом цветной продукт. В этой реакции, пероксидаза двухвалентно окисляется перекисью водорода и образует промежуточный продукт, который в конечном счете восстанавливается донором электронов, в качестве которых выступает ОФД. В следствие этого, окисленный ОФД имеет оранжевый цвет. Серная кислота останавливает реакцию.

Интенсивность цвета пропорциональна количеству связанных конъюгатов и, следовательно, концентрации антител к HCV в пробе. Интенсивность цветовой реакции на планшете считывается фотометром, сконструированным таким образом, что бы измерять поглощение света в каждой лунке микропланшеты.

РЕАГЕНТЫ