Экспериментальная иммунология: задачи, объекты и методы. Иммунизация и ее возможности при исследовании иммунной системы. Серологический метод исследования и его использование в иммунологии и смежных областях, страница 8

Этап

Параметры

Методы исследования

1. Этап скрининга

Иммуноморфология

Гематологические: общий анализ крови, формула крови;

Вес тела, селезенки, тимуса, почек, печени, легких;

Гистология: селезенки, тимуса, лимфатических узлов

Гуморальный иммунитет

Подсчет колоний клеток, образующих IgM к Т-зависимым и Т-независимым антигенам и ответ на митогены

Клеточный иммунитет

Ответ на действие митогена и смешанный лейкоцитарный ответ на аллогенные лейкоциты

Неспецифическая резистентность

Фагоцитарная активность клеток

2. Этап изучения механизмов

Морфология

Подсчет числа В- и Т-лимфоцитов в селезенке

Гуморальный иммунитет

Подсчет колоний клеток, образующих IgG к Т-зависимым антигенам

Клеточный иммунитет

Функции цитотоксических лимфоцитов

Неспецифический иммунитет

Количество перитонеальных макрофагов и анализ их функциональной активности

Оценка резистентности организма

Прививка опухолевых тканей:

саркома PYB6

меланома B6F10

Бактериальные модели:

Listeria monocytogenes

Streptococcus spp

Паразитарные модели:

Trypanosoma musculi

Plasmodium yoellii

Вирусные модели:

   вирус гриппа

Исследования первого этапа предназначены для выявления потенциальных иммунотоксикантов. Тесты второго этапа позволяют установить механизм иммунотоксичности и потенциальную способность вещества нарушать общую резистентность организма. Обычно токсикант вводится мышам в течение 14 дней, хотя в случае неясных результатов введение может быть продолжено до 30 и даже 90 суток.

Для изучения иммуносупрессорных свойств токсикантов в лабораторных условиях могут быть применены животные, зараженные патогенными микроорганизмами. С целью инфицирования используют: Listeria monocytogenes, Streptococcus pneumonia, Trypanosoma musculi, Plasmodium yoellii, вирус гриппа, вирус простого герпеса и т.д. В подобного рода исследованиях удаётся оценить состояние отдельных элементов иммунной системы. Продолжительность анализа составляет в среднем 2 - 3 недели.

Примером хорошо отработанного теста на иммунотоксичность ксенобиотика, является метод введения мышам, подвергшимся действию токсиканта, культуры трипаносом (Trypanosoma musculi). Эти эукариоты являются непаразитическими, экстрацеллюлярными микроорганизмами. Поражение мышей этими организмами на ранних этапах заражения контролируется врожденными механизмами резистентности, в частности фагоцитозом. В поздние стадии (10 дней инфекционного процесса) паразитемия контролируется механизмами антителообразования. Конечный этап (18 - 20 день) инфекционного процесса проходит под контролем как клеточного, так и гуморального иммунитета. Таким образом, в одном эксперименте можно определить влияние ксенобиотика на несколько элементов иммунной реакции (фагоцитоз, выработку антител, клеточный иммунитет). Вызванные токсикантом повреждения фагоцитоза, либо антителообразования, либо механизмов клеточного иммунитета, проявляются паразитемией в соответствующем периоде развития инфекции. Эта модель достаточно чувствительна и эффективна при оценке иммуносупрессорных свойств ксенобиотиков.

Методы оценки анафилактогенного, аллергизирующего, сенсибилизирующего действия лекарственных препаратов, ксенобиотиков и др. веществ

Термины, понятия, условия

Расшифровка, пояснения

Анафилактогенное действие

Аллергизирующее действие

Сенсибилизирующее действие

Лабораторные животные

Крысы, мыши, морские свинки, кролики

Формирование опытных и контрольных групп

7 – 10 животных, при необходимости отдельно по полу и возрасту

Обычные дозы препаратов

терапевтическая и 10-кратная терапевтической