Медицина \ Экспериментальная иммунология

Экспериментальная иммунология: задачи, объекты и методы. Иммунизация и ее возможности при исследовании иммунной системы. Серологический метод исследования и его использование в иммунологии и смежных областях, страница 10

3. Гиперчувствительность замедленного типа  - в рамках исследования иммунотропного действия при иммунизации антигеном.

4. Конъюнктивальная проба.  Морским свинкам ежедневно на протяжении 21 дня вводят внутримышечно исследуемый препарат, контрольной группе животных – растворитель. На 21 день проводят пробу – субконъюнктивально вводят разрешающую дозу препарата. Позитивный контроль – введение раствора гистамина. Реакцию регистрируют по внешним проявлениям – слезотечению, гиперемии, отеку век.

Все перечисленные тесты нужны для оценки собственно аллергизирующих свойств исследуемого препарата. Если предполагаются его антиаллергизирующие свойства, то результаты тестов будут отрицательными на фоне позитивных контролей. Кроме этого, оценивают синтез IgE в культуре мононуклеаров периферической крови человека. Это пролиферативный тест с ФГА с инкубацией лимфоцитов в течение 7 суток с последующим определением IgE в супернатанте с помощью набора ИФА

Тема № 5:  Серологический метод исследования и его использование в иммунологии и смежных областях

Серологический метод  представляет собой совокупность реакций, основанных на взаимодействии антиген-антитело и направленных на выявление в биологическом материале антител либо антигенов.

Серологический метод широко используется в различных областях фундаментальной и прикладной науки:

Области применения

Определяемые параметры или изучаемые явления

Экспериментальная иммунология

Определение эффективности развития антительного иммунного ответа на антиген при изучении его динамики и механизмов развития

Иммунобиотехнология

Определение эффективности иммунизации (при разработке диагностических и лечебных препаратов)

Диагностика в медицине (и ветеринарии), включая иммунодиагностику, клиническую иммунологию и др.

Определение групп крови, диагностика инфекционных и аутоиммунных болезней, определение напряженности поствакцинального иммунитета

Микробиология

Проведение серологического типирования (идентификации антигенов) чистой культуры микроорганизмов

Криминалистика

Определение видовой принадлежности белка с последующей его идентификацией

Этапы серологического метода:

  1. Получение исследуемого биологического материала, при необходимости, его предварительная обработка или подготовка к исследованию.
  2. Выбор серологической реакции, который определяется особенностями взаимодействующих антигенов или антител, а также особенностями исследуемого биологического материала.
  3. Постановка серологических реакций.
  4. Регистрация результатов – чаще всего осуществляется визуально либо под небольшим увеличением.
  5. Интерпретация результатов и оформление заключения.

 Преимущества и недостатки серологического метода 

Преимущества

Недостатки

·  серологический метод характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью

·  большинство реакций этого метода просты в проведении и учете, доступны широкому кругу лабораторий

·  как правило, безопасны, экономичны, поддаются стандартизации

·  Высокий процент ложноположительных и ложноотрицательных реакций – как следствие кроссреактивности между разными антигенами и антителами

·  Невысокая степень чувствительности или разрешающей способности (определяемая концентрация белка, как правило, не менее мкг/мл). Для повышения чувствительности впоследствии был разработан иммунохимический анализ.

·  Ограниченность возможностей метода  - серологические реакции эффективны в отношении лишь определенного спектра антител (агглютинирующих, преципитирующих или комплементсвязывающих), что связано  с их особенностями и особенностями антигенов. Другие антитела и антигены к ним идентифицируются с помощью реакций иммунохимического анализа

Взаимодействие антиген -  антитело

Скачать файл