Экспериментальная иммунология: задачи, объекты и методы. Иммунизация и ее возможности при исследовании иммунной системы. Серологический метод исследования и его использование в иммунологии и смежных областях, страница 12

·  Для удаления из сывороток перекрестно реагирующих антител применяют различные варианты их истощения (адсорбции). Адсорбированные сыворотки отличаются строгой специфичностью действия, но, как правило, титр антител в них низкий – от 1:40 до 1:320. Существуют различные варианты истощения (адсорбции) иммунных сывороток.  Одним из эффективных приемов истощения является добавление к поливалетной иммунной сыворотке растворенных антигенов, нейтрализующих антитела, ответственных за перекрестные реакции. Адсорбированные таким образом сыворотки применяют чаще всего в реакции преципитации и в реакции агглютинации. Однако сыворотки, истощенные простым добавлением гетерологического антигена, непригодны для  использования в реакции связывания комплемента. Для этой цели можно использовать метод истощения сывороток размельченными тканями, фиксированными 5% раствором формалина или спиртом. Существует также метод «блокирования» побочных антигенов. Сущность этого метода заключается в том, что животных иммунизируют экстрактами, предварительно обработанными иммунными сыворотками, полученными к тем антигенам, образование антител против которых нежелательно.

Классификация диагностических иммунных сывороток:

По феномену в серологическом методе

Агглютинирующие сыворотки

применяемые для обнаружения антигенов микроорганизмов

Преципицирующие сыворотки

предназначенные для выявления антигенов в исследуемом материале

Препараты антител

используются в иммунохимическом анализе

По направленности (по обнаружению антител/антигенов)

Антивирусные сыворотки

употребляемые для типирования вирусов в реакциях нейтрализации, торможения гемагглютинации и гемадсорбции

Антибактериальные

Сыворотки

применяемые для обнаружения антигенов микроорганизмов

Антитоксические сыворотки

нейтрализующие токсины

Принцип взаимодействия антиген - антитело может быть использован в качестве теста нейтрализации для идентификации бактериальных экзотоксинов и вирусов. Данный тест разработан в двух вариантах:

in vivo

in vitro

Область применения

Используется в диагностике инфекционных болезней, в патогенезе которых особое значение имеет экзотоксин. Предназначен для идентификации выделенного вируса, определения наличия антител в сыворотке крови больных и переболевших животных и т.д.

Принцип метода

Заключается в способности нейтрализующих антител иммунных сывороток  подавлять свойства экзотоксина

Схема метода

 В исследовательской и диагностической практике применяют серологические реакции, основанные на прямом взаимодействии антигена с антителом (агглютинация, преципитация) и опосредованные реакции (реакции непрямой гемагглютинации, реакция связывания комплемента), а также реакции с использованием меченных антител или антигенов (ИФА, РИА, метод флюоресцирующих антител).

Литература

1.  Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина. – 1999.  –  501 с.

2.  Хаитов Р.М. Иммунология. –  М.: Медицина. – 2000.  –  298 с.

  1. Klaus G.G.B. Lymphotyces. A practical approach. –  Oxford. –  1990. – 456р.
  2. Вязов О.Е. Лабораторная иммунология. –  М.: .Медицина. –  1970. –  278с.
  3. Фримель Г. Иммунологические методы. - М.: .Медицина. –  1987. –  322 с.
  4. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы и некоторые аспекты их клинического применения // Клиническая иммунология. –  №8. – 1996. –  С.7 - 12
  5. Хаитов Р.М., Гущин И.С., Пинегин Б.В. Методические указания по изучению иммунотропной активности фармакологических веществ. – М.: .Медицина. –  1999. – 156 с.
  6. Никитин   В.М. Справочник методов иммунологии. –  Кишинев: Штиинца. –  1982. –  304 с.
  7. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) испытанию иммуномодулирующего действия фармакологических средств. Потапнев М.П., Борткевич Л.Г., Печковский Д.В. и др. –  Минск. – 1999. –  30 с.
  8. Leslie Hudson, Frank C.Hay. Practical Immunology. – Loldon: Oxford. – 1989. – 507 р.
  9. Жавненко В.М., Науменков В.И., Алешкевич В.Н. Практикум по вирусологии. – М.: Дизайн ПРО. – 1998. – 144 с.
  10. Julius M.,  Cruse B.A. Atlas of immunology. – L.: Taylor and Francis. – 2004. – 1567 p.