Медицина \ Экспериментальная иммунология

Экспериментальная иммунология: задачи, объекты и методы. Иммунизация и ее возможности при исследовании иммунной системы. Серологический метод исследования и его использование в иммунологии и смежных областях, страница 2

Исследования in vitro

Исследования in vivo

Объект исследования

Объектом исследования является культура клеток

Цели исследования

Исследование  in vivo позволяет обеспечить естественные условия развития физиологического или патологического процесса – наличия влияния со стороны эндокринной и нервной систем, наличие детоксикационных систем и др.

Возможности исследования

Есть возможность исследования молекулярно-клеточных механизмов развития иммунных процессов

Есть возможность исследования общей целостной реакции организма при развитии реакций иммунной системы

Необходимость оборудования, реактивов, специальных помещений

Для исследований необходимы дорогостоящие реактивы, такие как питательные среды, вспомогательные клетки, сывороточные белки, стерильные условия, специально обученный персонал и т.д.

Для содержания животных необходимо специально оборудованное помещение – виварий, качественное кормление, витаминные добавки, обученный персонал, обеспечивающий правильный уход за животными

Особенности наблюдения за объектом в процессе эксперимента

Эксперимент прерывается на определенной стадии, так как поддерживать культуры клеток при длительном мониторинге сложно из-за возможности влияния дополнительных факторов. Для регистрации иммунологических феноменов требуется дорогостоящее оборудование

Реакция иммунной системы оценивается по поведению животного (оценка анафилактогенной и аллергизирующей активности ряда факторов), есть возможность мониторинга без проведения эвтаназии, при использовании крыс, морских свинок, кроликов и др. есть возможность прижизненного взятия биологического материала и длительного мониторинга

Особенности планирования эксперимента

Нужно учитывать необходимую

концентрацию клеток, желательность синхронизации культур клеток, время их максимально возможного поддержания в условиях in vitro

Необходимо учитывать индивидуальные различия животных по тем или иным признакам, так как эта гетерогенность может влиять на результаты исследования

Гуманный аспект 

Оба направления – эксперименты in vivo и in vitro дополняют друг друга, не являясь взаимоисключающими.

Культуры клеток

Культуры клеток представляют собой приблизительно гомогенную популяцию клеток, жизнеспособность и пролиферация которых поддерживается в специальной среде.   Культуры клеток бывают: первичные, полуперевиваемые и перевиваемые

Культуры клеток

Описание

Первичные

Культуры клеток, получаемые из ткани взрослых животных. Они обладают низким пролиферативным потенциалом и в лабораторных условиях имеют низкую продолжительность жизни (лимфоциты периферической крови, выделенные на градиенте плотности)

Полуперевиваемые

Перевиваемые культуры клеток (пересеваемые, пассируемые)

Примеры культур клеток, наиболее часто используемых в экспериментальной иммунологии:

Наименование культуры

Характеристика культуры

Назначение культуры

Raji

В-лимфобласты человека

Используется в опытах по исследованию цитотоксичности лимфоцитов в качестве клеток-мишеней

К-562

Эритробласты человека

Применяются для исследования цитотоксичности лимфоцитов в качестве клеток-мишеней

Yac-1

Клетки лимфомы мыши, индуцированной in vivo вирусом лейкемии Молони

Используется для изучения цитотоксического действия натуральных киллеров

McCoy В

Клетки, полученные из синовиальной жидкости  коленного сустава человека, страдающего артритом

Применяются для диагностики хламидийной инфекции.

Имеет чувствительность к некоторым вирусам (везикулярный стоматит)
Скачать файл