Основные принципы и диагностические возможности проточной цитометрии в клинической иммунологии и эндокринологии, страница 12

Используя панель антигенов для иммунофенотипирования (табл.3) можно будет сделать следующие заключения:

·    ОЛЛ-Т1 можно будет поставить по наличию экспрессии антигенов CD3 и CD7,       и отсутствию экспрессии других дифференцировочных антигенов;

·    ОЛЛ-Т2 по экспрессии ранее названных антигенов, а также CD2 и СD5;

·    ОЛЛ-T3 (кортикальный) определяется по экспрессии CD1a независимо от реактивности с другими Т-клеточными маркерами, включая и CD3 на мембране;

·    ОЛЛ-Т4 (зрелый) по наличию экспрессии sCD3 и отсутствию экспрессии CD1a.

                                                                                                                   Таблица 3

Иммунологическая классификация T-линейных острых лимфобластных лейкозов [23]

Подвариант лейкозa	Дифференцировочные антигены
	TdT	сyCD3	CD7	CD2	CD5	CD1a	sCD3
Про-Т-ОЛЛ                              Т1	+	+	+	-	-	-	-
Пре-Т-ОЛЛ                              Т2	+	+	+	+	+	-	-
Кортикальный-T-ОЛЛ          Т3	+	+	+	+	+	+	-/+
Зрелый-Т-ОЛЛ                        Т4	+/-	+	+	+	+	-	+

Обозначения: cy - цитоплазматическая экспрессия;  s - поверхностный; +/- - большинство позитивных случаев; -/+ - большинство негативных случаев; + - позитивный; - негативный.          

Необходимо отметить, что в пределах Т-ОЛЛ две подгруппы были определены по экспрессии a/b-цепей мембранного Т-клеточного рецептора (TCR) (группа а) и TCR g/d-цепей (группа б) в сочетании с CD3. Они могут представлять собой два клинически и фенотипически различных подтипа Т-ОЛЛ.

Большинство случаев Т-ОЛЛ имеют следующие дифференцировочные антигены: TdT+, HLA-DR-, CD34-, но эти случаи не всегда учитываются при диагностике и классификации.

Острые миелоидные лейкозы

Решение о постановке иммунофенотипического диагноза острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) после проведения первого этапа типирования принимается на основании обнаружения экспрессии двух или более миеломоноцитарных маркеров: анти-МРО, СD13, CD33, CDw65, СD117 (c-kit).

Следующий этап предполагает установление конкретной формы острого миелоидного лейкоза. Для этой цели необходимо руководствоваться набором иммунофенотипических маркеров, представленных в табл. 4.

Используя панель дифференцировочных антигенов (табл. 4) для определения той или иной формы ОМЛ, необходимо ориентироваться на следующие иммунофенотипические особенности:

·    для ОМЛ-М0 характерно наличие позитивных результатов только с двумя маркерами CD13 и CD33. С цитохимическими и специфическими лимфоидными маркерами (CD3, CD79a, CD22 - первый этап фенотипирования) - негативные результаты;

·    для ОМЛ-М1-М5 характерна экспрессия различных миеломоноцитарных маркеров. После проведения второго этапа конкретная форма устанавливается по табл. 4;

·    для ОМЛ-М6 (ОМЛ эритроидной линии) характерно наличие двух форм: раннего незрелого ОМЛ, неклассифицируемого маркерами, и зрелого, при котором наблюдается позитивная экспрессия антигликофорина (маркер эритроидного ростка);

·    для ОМЛ-М7 (ОМЛ мегакариоцитарной линии) характерно обнаружение позитивных результаов маркерами CD41, CD42 и CD61 (мембранный или цитоплазматический).

Г. Анализ ДНК и распределения популяций клеток по разным фазам клеточного          цикла

            У здорового человека процесс кроветворения характеризуется достаточно высоким постоянством, что проявляется в устойчивости основных лабораторных показателей, в том числе таких  параметров, как плоидность ДНК иммунокомпетентных клеток, пролиферативная активность, распределение клеток по фазам клеточного цикла [7] (рис. 3.). С введением в клиническую практику метода проточной цитометрии появилась возможность выявления признаков, характеризующих агрессивность опухолевого процесса (степень выраженности поли- и анеуплоидии, долю клеток, находящихся в S-фазе митотического цикла), которые в сочетании с клиническими и морфологическими характеристиками новообразования позволяют осуществлять дальнейший прогноз опухолевого процесса.