Основные принципы и диагностические возможности проточной цитометрии в клинической иммунологии и эндокринологии, страница 11

Первый этап относится к характеристике острого лейкоза В- или Т-линейного  ОЛЛ   или ОМЛ и включает большинство специфических маркеров лимфоидного или миелоидного происхождения, с целью выбора тех, которые экспрессируются на более ранних стадиях клеточной дифференцировки, и несколько линейно-неспецифических.  Панель дифференцировочных маркеров, необходимых для проведения этого этапа, представлена в табл. 1.

На первом этапе иммунофенотипирования определяется разновидность лейкоза: В-ОЛЛ, Т-ОЛЛ или ОМЛ. С этой целью используется панель из 15 дифференцировочных антигенов (табл. 1). После проведения этого этапа дальнейшая диагностика проводится следующим образом:

                                                                   Таблица 1

Панель  маркеров  для проведения  первого  этапа иммунофенотипирования [3]

·  В-лимфоидные:                                        CD19,  цитоплазматический CD22, CD79a, CD10

·  Т-лимфоидные:                                        цитоплазматический CD3, CD2, CD7

·  Миелоидные:                                           анти-МРО  (миелопероксидаза), CD13, CD33,

CDw65, CD117

·  Линейно-неспецифические:                    TdT, CD34, HLA-DR

Острые лимфобластные лейкозы.

1. В-линейные лейкозы диагностируются по экспрессии по крайней мере двух из трех следующих ранних В-клеточных маркеров: CD19, CD79a (mb-1) или CD22.

Следующим этапом является установление одного из 5 подвариантов В-линейного ОЛЛ. В этом случае нужно опираться на набор дифференцировочных маркеров представленных в табл. 2, с учетом данных, полученных на первом этапе типирования.

                                         Таблица 2

Иммунологическая классификация В-линейных острых лимфобластных лейкозов [23]

Подвариант лейкоза

Дифференцировочные антигены

TdT

CD19

CD79a

cyCD22

CD10

cym

sm

Sk/l

Пре-пре-В-ОЛЛ

В1

+

+

+

+

-

-

-

-

О-ОЛЛ (ОЛЛ «общего типа»)

В2

+

+

+

+

+

-

-

-

Пре-В-ОЛЛ

В3

+

+

+

+

+

+

-

-

Переходный пре-В-ОЛЛ

В4

+/-

+

+

+

+/-

+

+

-

Зрелый В-ОЛЛ

В5

-

+

+

+

+/-

+

+

+

Обозначения: cy - цитоплазматическая экспрессия; s - поверхностный; +/- - большинство позитивных случаев; + - позитивный; - - негативный.

Таким образом, при ОЛЛ-В1 будет наблюдаться только экспрессия ранних В-клеточных дифференцировочных антигенов;

·    при ОЛЛ-В2 помимо ранних антигенов появляется CD10, другие антигены по-прежнему будут отсутствовать;

·    при ОЛЛ-В3 нужно опираться не только на ранние антигены, но и на появление экспрессии цитоплазматического IgM;

·    при ОЛЛ-В4 выявляется еще и экспрессия поверхностного  sIgM;

·    при ОЛЛ-В5 не экспрессируется ТdT, который характерен только для ранних этапов развития гемопоэтических клеток, однако, здесь нужно  больше ориентироваться на цитоплазматическую и поверхностную экспрессию одной из легких цепей Ig k и l.

Необходимо добавить, что большинство случаев В-ОЛЛ - TdT+, HLA-DR+, кроме В-5, который чаще всего TdT-.

2. Т-линейный ОЛЛ определяется по цитоплазматической или мембранной экспрессии CD3. Реагирования с CD2 и CD7 недостаточно для того, чтобы говорить о Т-ОЛЛ. После того, как у больного будет поставлен диагноз Т-линейного ОЛЛ, следует этап определения одной из разновидностей Т-ОЛЛ. В данном случае необходимо использовать панель дифференцировочных маркеров, представленных в табл. 3, включая результаты 1 этапа типирования.