Основные принципы и диагностические возможности проточной цитометрии в клинической иммунологии и эндокринологии, страница 15

В данном случае на первый план при диагностике выступает обнаруживаемая одновременная экспрессия ранних и поздних антигенов, которая в норме никогда не определяется.

·  Избыточная экспрессия миелоидных антигенов.

Другой аберрантный тип экспрессии антигенов на лейкемических клетках - это избыточная экспрессия антигенов, присутствующих на нормальных миелоидных клетках.

·  Отсутствие экспрессии миелоидных антигенов.

Отсутствие экспрессии миелоидных антигенов на опухолевых клетках также является аномалией фенотип.

Недостатком иммунологического метода при использовании его для определения резидуальной болезни является возможность изменения фенотипа в ходе болезни и терапии. Однако изменения экспрессии антигенов происходят редко и не они определяют неудачи в определении резидуальных опухолевых клеток и интерпретации этих результатов.

Открывшиеся возможности в области детекции МRD достаточно серьезно изменили взгляды на биологические особенности острых лейкозов, на оценку полноты ремиссии, возможность предсказания рецидива. Возникло понятие молекулярной ремиссии. Возможно, в дальнейшем будет изменена терапевтическая тактика ведения больных с острыми лейкозами, у которых выявляется MRD.

В заключении неообходимо отметить преимущества проточной цитометрии над другими методами флюоресцентных измерений:

1.  Объективность;

2.  Высокую чувствительность (новые приборы могут определять более чем 1000 флюорохромных молекул на клетку);

3.  Высокую скорость, позволяющую анализировать гораздо большие клеточные объемы (100000 событий в минуту);

4.  Способность определять редкие клетки со специфическими характеристиками в     гетерогенной популяции;

5.  Способность к изучению жизнеспособных нефиксированных клеток;

6.  Возможность выполнения сложных одновременных измерений нескольких параметров каждой индивидуальной клетки в суспензии.

Сейчас появилась уникальная возможность работы с двойной,  тройной (рис.4.) и даже четырех-цветной флюорохромной меткой, позволяющая анализировать малые  объемы  клеток  и  несколько популяций одновременно. Все это делает проточно-цитометрический анализ одним из наиболее перспективных методов диагностики


онкогематологических заболеваний.

Рис. 4. Точечный график, показывающий распределение клеток, окрашенных двойной меткой.

Список литературы

1.     Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Маханова Л.А., Тупицын Н.Н. Иммунологический фенотип лейкозной клетки.  - М.: Медицина.- 1989. – 286с.

2.     Барышников А.Ю., Сыркин А.Б., Полосухина Е.Р., Шишкин Ю.В. Прогностическое значение экспрессии CD95 (FAS/ APO-1) при остром лимфобластном лейкозе у детей // Рос. онкол. ж. - 1998. - №.4. - C.31-35.

3.     Бене М.К., Кастолди Г., Напп В. и др. Предложения для иммунологической классификации острых лейкозов // Гематол. и трансфузиол. - 1996. - Т.41, № 6. - С.43-45.

4.   Винделов Л., Христенсен И. Проточный цитометрический анализ ДНК и его применение в клинической и экспериментальной онкологии // Гематол. и трансфузиол. - 1994. - № 6.-С. 8 -12.

5.     Гальцева И.В., Паровичникова Е.Н., Савченко В.Г. Минимальная остаточная популяция лейкемических клеток у больных острыми миелоидными лейкозами // Тер. архив. - 1997. - С. 74-79.

6.     Грачева Л.А.  Цитокины в онкогематологии.  -  М.:  Алтус. - 1996. – 168 c.

7.     Козинец Г.И., Погорелов В.М., Котельников В.М. и др. О стабильности кроветворения и его лабораторных показателей // Лаб. дело. - 1988. - № 7. - С.3-7.

8.     Крокер Д.Ж. Показатели клеточной пролиферации при злокачественных лимфомах с особым рассмотрением ядрышкообразующих районов // Гематол. и трансфузиол. - 1994.-№ 6. - С. 12 - 18.

9.     Номенклатура антигенов CD (кластеров дифференцировки лейкоцитов) на ноябрь 1994 года // Гематол. и трансфузиол. - 1994. - Т.39,  № 6. - С. 45-48.

10. Шмаров Д.А., Митерев Г.Ю., Кучма Ю.М., Козинец Г.И. Проточная цитометрия в определнии ДНК-анеуплоидии у больных острыми лейкозами // Тер. архив. - 1996. - № 7. - С. 11-14.