Аналитические основы клинической лабораторной диагностики, страница 7

В хорошо отработанных аналитических методах калибровочный график не только линеен, но и "проходит через нуль", т.е. если концентрация аналита равна нулю, то и показания прибора также равны нулю. Это облегчает построение калибровочного графика, так как достаточно только одной калибровочной пробы, поскольку одна точка уже существует - это нуль. При этом упрощаются и последующие расчеты, так как концентрация пропорциональна оптической плотности. В этом случае вычисляют константу или фактор расчета путем деления концентрации калибровочного раствора на его оптическую плотность, а при вычислении результатов опытных проб оптическую плотность просто умножают на найденную при калибровке величину. Рекомендуется всегда строить калибровочный график по нескольким точкам, соответствующим области как нормальных, так и патологических значений концентрации аналита в биологической жидкости. Это служит залогом эффективности и линейности метода во всем диапазоне возможных значений.

Если калибровочный график не проходит через нуль, необходимо определить, является ли это результатом случайной погрешности, которой можно пренебречь, или это закономерное отклонение, вызванное, например, мутностью раствора, и пренебрежение им может вызвать систематическую погрешность. Вычислительные программы большинства автоматических анализаторов построены так, что калибровочный график обычно проходит через нуль. Калибровка этих приборов осуществляется с помощью встроенного микропроцессора. Используемые при этом математические приемы - см. в разделе "Статистические методы". Если калибровочный график налаживаемого метода получился линейным и результаты воспроизводимы, можно переходить к исследованию биологического материала.

Растворы, определение, способы выражения концентрации растворов, стабильность.

В лабораторной практике используются в основном растворы реагентов.

Раствор — устойчивая однофазная система переменного состава, состоящая из двух или более компонентов (растворителя и растворенных веществ). Растворы занимают промежуточное состояние между механическими смесями и химическими соединениями. Количественный состав раствора определяется его концентрацией.

Основные способы выражения концентрации:

Весовые проценты — число весовых частей растворенного вещества в 100 весовых частях раствора

Моляльность — число молей растворенного вещества, содержащихся в 1 кг растворителя

Молярность — число молей растворенного вещества, содержащихся в 1 л раствора

Нормальность — число грамм-эквивалентов растворенного вещества в 1 л раствора

Титр — количество граммов растворенного вещества, содержащегося в 1 см³ раствора

Для приготовления растворов в клинической химии используют воду. Для получения чистой воды используют различные методы:

·  фильтрование — удаляются только нерастворимые примеси;

·  дистилляция — перегонка для удаления растворенных веществ;

·  деминерализация — последовательное удаление содержащихся в вода катионов и анионов с помощью колонок, заполненных ионитами (чаще всего синтетическими ионообменными смолами — анионитами и катионитами).

В лабораториях используют чаще всего дистиллированную воду, иногда бидистиллированную, т. е. перегнанную дважды. Всегда нужно использовать свежеприготовленную воду. Для некоторых анализов требуется вода, не содержащая С0₂ (для рН-метрии). В этом случае бидистиллят кипятят в течение 5—10 мин, охлаждают без доступа воздуха и используют в течение нескольких часов.

Стабильность растворов зависит от их концентрации. Основные растворы при хранении в холодильнике стабильны в течение нескольких недель до нескольких месяцев, в зависимости от природы растворенных веществ. Рабочие растворы используют обычно в течение одного или нескольких дней.

Правила и типы приготовления растворов, принципы использования
буферных растворов, индикаторы.

Для приготовления многих растворов в качестве растворителя используются буферные растворы — водные растворы, сохраняющие определенную концентрацию ионов Н+ (рН) при добавлении небольших количеств сильных кислот и щелочей. Они представляют собой растворы слабой кислоты и ее соли, или слабого основания и его соли, взятых в определенном соотношении.