Аналитические основы клинической лабораторной диагностики, страница 11

Прообразом систем «сухой химии» могут служить лакмусные бумажки для определения рН растворов, разработанные еще в XIX веке. Среди первых диагностических тестов на твердофазном носителе реактивов были бумажные полоски для качественного определения сахара в моче, а затем и других ее компонентов. Оценка результатов производилась по изменению окраски реакционной зоны. Введение цветных шкал для визуальной оценки позволило проводить полуколичественные определения. Такие экспресс-тесты в виде моно- (на один компонент) и политестов (на несколько компонентов) для исследования мочи (рН, кетоны, глюкоза, белок, билирубин, уробилиноген, эритроциты, гемоглобин, нитриты, удельный вес) и некоторых компонентов в сыворотке крови (например, мочевина, глюкоза, псевдо-холинэстераза) выпускаются многими фирмами («Лахема», Чехия, «Рош Диагностикс», «Мерк», Германия, «Ames», США и др.). Системы «сухой химии» позволяют определить количественно различные компоненты биожидкостей: субстраты (глюкоза, мочевина, билирубин и его фракции, креатинин, белок, триглицериды, холестерин, альбумин), ферменты (амилаза, АлАТ, АсАТ, ЛДГ, КК и КК-В, гамма-ГТ, липаза, щелочная фосфатаза), ионы (фосфор, кальции, аммиак), лекарства (фенобарбитал, теофиллин и др.).

Практически все системы “сухой химии” состоят из трех основных частей: реактивной, отражательной и подложки.

Разработка систем «сухой химии» проводится по двум основным направлениям: с применением импрегнированных волокон и с использованием многослойных слайдов.

В экспресс-тестах первого типа в качестве носителя используют импрегнированные волокна из чистой альфа-целлюлозы. Реактивы адсорбируются на носителе путем погружения в раствор и последующим высушиванием.

В диагностических полосках второго типа, представляющих собой многослойные пленки, в качестве подложки используют негнущийся пластик или другой подобный пластику материал, который может быть прозрачным или отражающим (перекрестно связанный желатин, агароза, поливиниловый спирт, алгинат, поливинилпирролидон или ацетат целлюлозы).

Комбинации различных технологий «сухой химии» используются многими фирмами для производства систем для экспресс-диагностики в различных областях клинической химии.

Например, в полностью автоматизированном анализаторе «Stratus» (фирма «American Dade», США) используется технология, представляющая собой комбинацию иммуноферментного, флюороиммунного анализов и кинетической энзимологии. В этой системе измеряется фронтальная поверхностная флюоресценция, и она предназначена для анализа лекарств и гормонов.

Тест-системы японской фирмы «Fuji Photo Film» очень похожи на системы фирмы «Кодак», но они позволяют проводить определение мочевины, глюкозы, амилазы в цельной крови.

Фирмой «Ames», США, разработаны диагностические полоски для определения некоторых лекарств, основанные на принципе конкурентного связывания белков с использованием меченых флюорофорами субстратов и на иммунологической реактивности апоэнзимов.

Экспресс-тесты в виде диагностических полосок или имеющих формат «платформы», основанных на различных технологиях, выпускает фирма «Jant Pharmacal Corporation», США (тесты для определения и визуальной оценки беременности, холестерина, амфетамина, кокаина, опиатов, мемфетамина, бензодиазепина).

Преимущества и недостатки систем «сухой химии» и их применения

Системы «сухой химии» являются гибким диагностическим средством для тех ситуаций, когда необходимо получение быстрых и надежных результатов (скорая помощь; у постели больного; полевые условия, профосмотры, скрининговые обследования, амбулаторные приемы и т. д.).

К их достоинствам относятся:

·  быстрота и простота анализа;

·  малый объем биожидкости, необходимый для анализа;

·  возможность получения качественных и полуколичественных результатов без использования оборудования и высококвалифицированного персонала;

·  возможность проведения анализа в цельной крови (во многих случаях);

·  простота обслуживания приборов для количественного определения.

Недостатками систем «сухой химии» являются:

·  довольно высокая стоимость анализа;

·  зависимость выбора метода от производителя;

·  возможность интерференции лекарств.

Основная часть стоимости приходится на дорогостоящую технологию, так как каждая партия требует калибровки, и специфическая информация для каждого носителя реактивов должна быть нанесена на магнитный код.

Развитие лабораторных тестов, основанных на использовании реактивов в сухом виде, продолжается в разных направлениях. Внедрение систем «сухой химии» в практику значительно расширяет возможность лабораторной диагностики.