Аналитические основы клинической лабораторной диагностики, страница 2

6.  Активность ферментов на преформированное количество веществ по времени и объему выражается как моль/(с.л); мкмоль/(с.л) нмоль/(с.л).

При переводе единиц массы в единицы количества вещества (молярные) коэффициент пересчета

где Mr — относительная молекулярная масса.

При использовании данной формулы получаются следующие единицы количества вещества (табл. 4)

Таблица 4.

Перевод единиц массы в единицы количества вещества.

Таблица 5.

Коэффициенты перевода единиц активности ферментов.

Принципы налаживания лабораторных методов исследования.
Общие правила приготовления реактивов.

Выбор, налаживание и освоение метода исследования – один из самых ответственных этапов лабораторной работы. Хотя общие принципы этого этапа являются одними и теми же во всех разделах лабораторной медицины, однако каждый раздел имеет свою специфику. Выбор метода определяется его свойствами и их соответствием клиническим задачам данного лечебного учреждения и материально-техническим возможностям лаборатории. Следует, где только это, возможно, использовать унифицированные или стандартизованные методы, свойства которых апробированы в квалифицированных (экспертных) лабораториях, и протоколы выполнения которых четко прописаны. При внесении тех или иных модификации с учетом имеющегося оборудования и опыта сотрудников лаборатории эти отклонения от стандартного протокола должны быть подробно документированы и отражены в "Руководстве по качеству клинических лабораторных исследовании" данной лаборатории, а точность результатов исследований должна соответствовать установленным нормам. Детали налаживания метода исследования во многом зависят от того, идет речь о ручной или автоматизированной работе, используются готовые наборы реактивов или они должны готовиться непосредственно в лаборатории.

На рабочем месте следует иметь протокол методики, оформленный так, что каждая новая процедура начинается с новой строки, а сами процедуры пронумерованы по порядку их выполнения. Полезно в описании методики привести прописи всех используемых в процессе анализа ре активов с указанием квалификации их чистоты.

Удобнее и проще всего налаживать методику при наличии готового набора реактивов нужного качества заводского изготовления; в лаборатории остается только приготовить растворы согласно заводской инструкции. Если таких наборов в распоряжении лаборатории нет или они недоступны лаборатории из-за своей цены, приходится использовать реактивы, полученные из разных источников. При этом может быть неизвестно, соответствуют ли эти реактивы по своему качеству требованиям налаживаемого метода. В этом случае может оказаться необходимой проверка качества реактивов, а иногда очистка или даже синтез простейших соединений. Теоретически совершенно чистых реактивов не существует, в каждом препарате есть какое-то количество примесей. Практически важно только, чтобы они не препятствовали данному анализу. В связи с тем, что разные партии реактивов могут содержать различные примеси, не всегда оговоренные в стандарте на данный реактив, может оказаться, что одна партия для конкретного вида исследования пригодна, а другая не пригодна, хотя обе имеют одинаковую квалификацию. Поэтому каждая новая партия реактивов должна подвергаться проверке на пригодность. Приготовление реактива начинается со взвешивания. Надо готовить такое его количество, которое может быть израсходовано за месяц (самое большое – за 2 мес.), но в то же время навеска не должна быть менее 20-30 мг, так как иначе точное взвешивание весьма осложняется. При приготовлении калибровочных растворов в прописях обычно указывают круглые числа, например, 100 мг или 0,2 ммоля, которые должны быть растворены в 50 или 100 мл растворителя. Если реактив дефицитен или навеска мала, удобнее точно взвесить то количество реактива, которое сразу же попало на весы: допустим, вместо 10 мг взять 9,3 мг и растворить их в меньшем количестве воды (в данном случае не в 100 мл, а в 93 мл). Растворы обычно отмеривают с помощью мерной посуды - мерных колб и цилиндров, но иногда бывает удобно взвесить растворитель на весах, особенно если нужно отмерить большие и некруглые количества (например, 1450 мл). Это часто оказывается точнее, чем отмеривание нескольких объемов; не надо только забывать, что относительная плотность многих растворов отлична от 1.