Аналитические основы клинической лабораторной диагностики, страница 5

Изменение рН, очевидно, будет тем меньше, чем меньше количество прибавленной щелочи относительно присутствовавших в растворе кислоты и ее соли, причем максимальный буферный эффект будет в той точке, где количества кислоты и ее соли равны, а рН раствора численно равен константе диссоциации. По мере удаления от этой величины буферный эффект слабеет. Приведенные рассуждения относятся и к тому случаю, когда добавляется не щелочь, а кислота.

Способность раствора противостоять прибавлению кислоты или щелочи называется его буферной емкостью или силой. Она выражается в миллимолях кислоты или щелочи, которые надо прибавить к 1 мл раствора, чтобы его рН изменился на 1 единицу.

При хранении растворов надо иметь в виду, что основными причинами, которые могут привести к случайному изменению рН, являются попадание угольной кислоты из воздуха и выщелачивание стекла. Углекислота воздуха сказывается главным образом на растворах, рН которых выше 7, поскольку более кислые растворы угольную кислоту не поглощают, уберечься от ее влияния проще всего, закрывая флаконы с реактивами пробками. Выщелачивание посуды зависит в первую очередь от сорта стекла, а также от длительности хранения реактива, оценить его влияние в условиях клинической лаборатории непросто, поэтому надо проявлять определенную осторожность. Пластмассовые флаконы, пробирки и кюветы, как правило, делаются из материала, который не выщелачивается.

Калибровка, определение, классификация калибровочных материалов,
правила их приготовления.

Когда реактивы, необходимые для выполнения избранного метода исследования, готовы, приступают к анализу калибровочных проб, по данным которых строят калибровочный график. Большинство количественных клинических лабораторных методов исследования не являются абсолютными и предполагают калибровку с использованием калибровочных материалов. Исключение составляют, главным образом, те случаи, когда определяется физический показатель - плотность, масса, показатель преломления. Калибровочные материалы - это материалы, состав которых заранее известен и свойства которых “прослеживаемы", т.е. имеют доказанное соответствие свойствам стандарта того аналита, исследование которого осуществляется с помощью калибруемого метода. Стандартными образцами метрологи называют образцы, с которыми сравнивают исследуемые величины: например, метр для измерения длины или гири определенной массы для проверки весов. Существуют банки стандартных или первичных референтных материалов для ряда аналитов, исследуемых в клинических лабораториях, различают первичные и вторичные калибровочные материалы. В первом случае речь идет о растворах, при изготовлении которых в их состав было введено определенное, точно измеренное взвешиванием количество анализируемого вещества. Исходным материалом для приготовления первичных калибровочных материалов должны служить стандарты исследуемых аналитов, что и обеспечивает "прослеживаемость" свойств калибровочного материала. В некоторых случаях первичные калибровочные материалы могут быть приготовлены непосредственно в лаборатории - например, когда для калибровки метода определения железа готовится раствор его хлористоводородной соли путем растворения навески железной проволоки в соляной кислоте. При этом точно известно, сколько грамм-молей железа содержится в одном литре раствора, и он может непосредственно использоваться для калибровки. Однако, не всегда удается приготовить такой калибратор. Например, очень трудно получить не содержащий воду и другие примеси пригодный для приготовления навески препарат даже такого относительно простого белка, как альбумин, не говоря уже о более сложных и специфических протеинах. В этом случае готовят раствор, содержащий нужное вещество в примерно подходящей концентрации, а затем определяют его состав, используя надежный метод - в случае альбумина определяют его чистоту методом электрофореза, а содержание белка по количеству азота после сжигания. Такой калибровочный раствор называют вторичным.