Овладеть минимальными методами
работы с культурой микроорганизмов.
Ход работы:
Посев культуры;
Выделить чистую культуру;
Описать культурные свойства
выделенной культуры;
Описать морфологические
характеристики;
Провести
физиолого-биохимические тесты;
Идентификация.
9.03.2006 (четверг)
Посев культуры.
Источник микроорганизмов (№17)
в физиологическом растворебыл предоставлен Колесовой Н.Д.
(к.317 НГУ), в объеме 5 мл.
Стеклянную пипетку (рис.
№1) достаем из пенала (рис. №2), опускаем в пробирку с
микроорганизмами; отбираем пробу (V=2-3 мл)
и опускаем её в пробирку с питательной средой - 1% молоко (V=5мл) и выдуваем. При этом в пробирке с молоком и
с физиологическим раствором не касаемся их стенок. Вся работа
производиться в радиусе 15 см, от горящей спиртовки, необходимое
условие стерильности. Также открывая пенал и крышки пробирок, необходимо
обжигать (t=1-2 сек) над пламенем
спиртовки (1-2 см).
Помешаем пробирку с
питательной средой и микроорганизмами в термостат (Т=36ºC) на 7 дней.
16.03.2006 (четверг)
·
Достаем из термостата пробирку и смотрим на то, что получилось,
наблюдаю жидкую мутную фазу и густую белую фазу (рис. №3). Произошло
скисание молока (сбраживание), следовательно, есть рост бактерии и получена
накопительная культура.
Выделение чистой культуры.
Выделяю чистую культуру, с
которой в дальнейшем я буду работать. Для этого берем чашку Петри (№1)
с твердой агаризованной средой, мысленно делим дно чашки на 4 сектора (рис.
№4) и подписываем 1,2,3,4.
Микробиологическую петлю
прокаливаем над спиртовкой и охлаждаем о внутреннюю поверхность пробирки
с бактериями (прикасаемся), вносим в жидкость, касаемся густой белой
фазы, вынимаем, и в секторе 1 проводим штрих, при этом не царапаю агар (рис.
№5). Угол наклона к столу равен 20º.
Пробирка с её содержанием нам
уже не нужна.
Далее прокаливаем петлю над
спиртовкой и охлаждаем о внутреннюю поверхность крышки чашки Петри и
перечеркиваем штрих и ведем линию во 2 сектор и делаем там новый штрих (рис.
№6)
Аналогично для 3 и 4 штриха (рис.
№7). Вся работа производиться в радиусе 15 см, от горящей
спиртовки, необходимое условие стерильности.
Далее помешаем чашку Петри (№1)
в термостат (Т=36ºC) на 7 дней,
а пробирку в шкаф с комнатной температурой. При этом чашку Петри(№1)
помещаем крышкой вниз, чтобы испарившиеся жидкость не попала на культуру.
23.03.2006 (четверг)
·
Достаем из термостата чашку Петри (№1) и смотрим на то,
что получилось, наблюдаю (рис. №8) рост 10 колоний в виде округлых форм
разного размера бежевого цвета на разных участках штрихов.
·
Микробиологическую петлю прокаливаем над спиртовкой и охлаждаем о
внутреннюю поверхность крышки чашку Петри (№1) (прикосновением).
Дотрагиваемся до одной из колоний и проводим штрих, в новой чашке Петри на
чистом агаре, при этом не царапаю агар. Угол наклона к столу равен 20º.
Вся работа производиться в радиусе 15 см, от горящей спиртовки,
необходимое условие стерильности.
·
Далее помешаем чашку Петри (№2) в термостат (Т=36ºC) на 7 дней. При этом чашку Петри (№2)
помещаем крышкой вниз, чтобы испарившиеся жидкость не попала на культуру.
Описать культурные свойства
выделенной культуры.
Работаю с чашкой Петри (№1);
с той колонией, до которой дотронулись микробиологической петлей.
Описываю визуально морфологические характеристики:
Признаки
Описание
признака
Рисунок
Диаметр
1,9 мм
Профиль колонии
выпуклый
Форма колонии
неправильная
Край колонии
волнистый
Поверхность колонии
шероховатая
Структура колонии
однородная
30.03.2006 (четверг)
·
Достаем из термостата чашку Петри (№2) и смотрим на то,
что получилось, наблюдаю (рис. №9) однородный рост колонии бежевого
цвета вдоль штриха. Следовательно, культура чистая.
