Биохимия фактора IX и молекулярной биологии гемофилии B, страница 6

Взаимодействие фактора IX и фактора IXa с мембранами фосфолипида изучилось, используя phosphatidylserine/phosphatidylcholine пузырьки. MLID86131633 76 Фактора IX связывает с пузырьками в присутствии Ca2 +, но не в присутствии Mg2 + или EDTA. Кроме того, фактор IX, подготовленный от плазмы пациентов, кому дают warfarin, не взаимодействует с пузырьками фосфолипида даже в присутствии Ca2 +. Эти результаты подчеркивают важность g-carboxyglutamic кислотно - богатой области(региона) в определении обязательных по фосфолипиду свойств. Специфика фактора IX для кислого фосфолипида (например, phosphatidylserine) может параллельный другой витамин белки K-зависимых, которые были оценены, используя phosphatidic кислота, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, или специфика может быть различна. Фактор IX близость к phosphatidyl- мембранам холина - phosphatidylserine независим от phosphatidylserine концентрации с phosphatidylserine составами > 20-30 % MLID87075663 91; Kd приблизительно 1-2 mM был измерен. Выражение обязательных по фосфолипиду свойств вовлекает два металлически - зависимых конформационных перехода. MLID87222379 89 Подобно фактору IX, фактор IXa связывает с пузырьками фосфолипида в присутствии ионов кальция. Эксперименты, в которых Trp 42 видоизменен говорят, что ароматический стек аминокислоты может также играть роль в закреплении фактора IX к пузырькам фосфолипида. MLID93185650 92,93

Факторы IX и IXA связывают определенно с бычими артериальными эндотелиальными ячейками и конкурируют за то же самое местообитание. MLID83247428 MLID83178296 MLID85190528 94-96 Закрепление половин - максимален в 2.1 nM для фактора IX и 2.5 nM для фактора IXa. MLID83247428 94 Приблизительно 20,000 молекул фактора IX связывают в ячейку, и предполагаемый белок рецептора (Г. 140,000) был идентифицирован. MLID87194814 97 Закрепление факторов IX или IXA на рецептор не запрещен антителами, направленными против фактора VIII, von Willebrand фактор, или EGF рецептор. Взаимодействие фактора IX с эндотелиальными ячейками запрещено пептидом, соответствующим g-carboxyglutamic кислотной области (остатки 1-42) MLID90062154 98; Ki для этого взаимодействия - приблизительно 0.05 mM. Химерные белки, в которых ароматический стек аминокислоты или сначала EGF область фактора IX заменен сопоставимой областью от фактора X, конкурируют за фактор IX обязывающий с эндотелиальными ячейками, предлагая, что эти области не важны во взаимодействии фактора IX с эндотелиальными ячейками. MLID91224974 99 Cheung и коллегы MLID93015940 100 использовали сайт-направленный мутагенез g-carboxyglutamic кислотной области фактора IX, чтобы показать, что остатки 5 и 10 требуются для закрепления фактора IX к эндотелиальным ячейкам. Однако, деятельность коагулянта белков мутанта осталась неповрежденной, предлагая отличные взаимодействия между фактором IX с эндотелиальными ячейками и фосфолипидами. MLID93015940 100

Активизированные тромбоциты, но не отдыхающие тромбоциты, связывают факторы IX и IXA. MLID90241883 MLID89123446 101,102 характер(природа) фактора тромбоцита IX обязательное местообитание не известен, ни - фактические поверхности на факторе IX, которые требуются для взаимодействия с оболочками тромбоцитов. Обязательное местообитание для факторов IX и IXA может быть отлично. Взаимодействие фактора IXa с тромбоцитами - по крайней мере в части, установленной g-carboxyglutamic кислотной областью. 103 Фактор IXa, в котором первая EGF область фактора IX заменена первой EGF областью фактора X, связывает обычно с тромбоцитами, предлагая, что или первая EGF область не вовлечен в закрепление тромбоцита, или первая EGF область фактора X достаточна для этого взаимодействия. MLID92235087 104 Фактор IXa связывает с фактором IX обязательное местообитание но также и связывает с дополнительными местообитаниями, которые не связывают фактор IX. В присутствии насыщения концентраций факторов VIIIa и X, Kd фактора IXa (Kd = 0.5 nM) закрепление - пять раз ниже чем таковой фактора IX. MLID90062111 MLID86243664 105,106 важность фактора VIII для факторов IX и IXA, обязывающего с неуверенными(сомнительными) остатками мембран ячейки.