Биохимия фактора IX и молекулярной биологии гемофилии B, страница 2

Организация гена фактора IX почти идентична таковому фактора X, фактор VII и белок C (см. рис. 107-4). После транскрипции, фактор IX mRNA произведен, что является приблизительно 2.8 КБ. MLID82272386 MLID83065193 6,7 Этого mRNA включает 5 ' нетранслируемая область и длинный 3 ' нетранслируемая область 1.4 КБ. Этот 3 ' последовательность содержит почтово (A) хвост почти 1.4 КБ 3 ' к терминирующему кодону и типичной последовательности обработки (AATAAA) 16 bp 5 ' к этому polyadenylation местообитанию. Это ведет к длинному, некодируя хвост в mRNA. MLID84236100 MLID86000558 9,11

Синтез Фактора IX

Фактор IX синтезируется в гепатоците как белок предшественника; это тогда подвергается ряду внутриклеточных посттрансляционных модификаций, ведя к производству зрелых, полностью активный фактор IX (рис. 107-3). Последовательность кодирования фактора IX ген кодирует два пептида, которые удалены до секреции зрелого фактора IX в кровь: пептид сигнала с 28 остатками, который направляет рождающуюся цепь пептидов к эндоплазматической сети и propeptide с 18 остатками между пептидом сигнала и зрелой N конечной остановкой фактора IX. MLID83065193 7 пептид сигнала,  расщеплен компания - с точки зрения перевода пептидазой сигнала. Propeptide содержит местообитание признания g-карбоксилирования, которое направляет g-карбоксилирование смежных глутаминовых кислотных остатков в g-carboxyglutamic кислотной области зрелого фактора, IX. Этих элемента признания определен аминокислотами -18, -17, -16, -14, и -10 к N конечной остановке этой области(региона). K-зависимый витамина carboxylase связывает с местообитанием признания g-карбоксилирования в пределах propeptide. MLID89386645 MLID87102866 25,26 реакция карбоксилирования, катализируемая carboxylase, требует уменьшенной формы витамина K (витамин KH2), молекулярный кислород, двуокись углерода, и фактор IX предшественник, uncarboxylated profactor IX, содержа глутаминовые кислотные остатки. 27 carboxylase - фермент с молекулярной массой 94,000, который является достаточным к carboxylate подложка предшественника в присутствии необходимых кофакторов. MLID91172787 MLID93281629 MLID93391357 MLID92086858 28-31 carboxylase - мембранный белок, и его каталитическая деятельность проживает на просветной стороне гранулярной эндоплазматической сети. MLID79226052 MLID80175363 32,33

Кроме того, Asp 64 подвергается b-гидроксилированию. От cDNA последовательностей фактора IX, MLID82272386 MLID83065193 6,7 фактора X, MLID84222026 34 белок C, MLID85269639 MLID85014826 35,36 белка S, MLID86313649 37 и фактор VII, MLID86205965 38 очевидно, что определенные аспарагиновые кислотные остатки в формах предшественника этих белков подвергаются b-гидроксилированию пост-с точки зрения перевода. Stenflo и другие. 39 предложили что последовательность согласия, состоящую из Cys-X-Asp/Asn-X-X-X-Phe/Tyr-X-Cys-X-Cys сигналов этот случай. Фактор IX содержит приблизительно 0.4 моля b-hydroxyaspartic acid/mol фактора IX. MLID88033058, 40,41 Этих измененных аминокислоты сформирована из аспарагиновой кислоты пост-переводным процессом, катализируемым 2-oxoglutarate-dependent dioxygenase, MLID89098949 42, который был частично очищен от бычей печени. MLID90256774 43 b-hydroxylase присутствует в пределах эндоплазматической сети.

Бычий и человеческий фактор IX - гликопротеиды, которые содержат приблизительно углевод 17 %. Бычий фактор IX содержит четыре N-связываемый glycosylation местообитания в остатках 158, 168, 173, и 261. MLID75036029 MLID80056619 MLID83213285 44-46 Этих остатков соответствуют остаткам 157, 167, 172, и 261 в человеческом факторе IX. Однако, остаток 172 - треонин в человеческом факторе IX, и остатке 261 недостатки соответствующая последовательность согласия для N-связанного glycosylation. Два O-связал glycosylation местообитания были идентифицированы в первой EGF области фактора IX. MLID90062160 MLID92388094 47,48,  O-связанный сахар в остатке 53 составлен из глюкозы и ксилозы в равных мольных отношениях, с глюкозой, связанной с Ser 53. Аналогичный trisaccharide был проанализирован, что связан с Ser 53 из бычего фактора IX и имеет структуру D-ксилоза p 1-3-D-xylose p 1-3-D-glucose p b I-O-serine-53. MLID90130422 49 O-связанный сахар в остатке 61 составлен из равных мольных отношений галактозы, fucose, N-acetylglucosamine, и N-acetylneuraminic кислоты и связан с Ser 61 через fucose остаток. MLID92388094 MLID93320029 48,50