Биохимия фактора IX и молекулярной биологии гемофилии B, страница 4

G-Carboxyglutamic Кислотная Область

NH2 терминал g-carboxyglutamic кислотная область человеческого фактора IX включает 12 g-carboxyglutamic кислотные остатки, расположенные в положениях(позициях) 7, 8, 15, 17, 20, 21, 26, 27, 30, 33, 36, и 40. MLID77026369 MLID76210956 66,67 g-carboxyglutamic кислотная область определяет некоторых из критических обязательных по кальцию местообитаний белка и требуется для взаимодействия фактора IX с мембранными поверхностями в присутствии ионов кальция. MLID84185715 68 Естественно встречающихся точковых мутаций глутаминовых кислотных остатков, предназначенных, чтобы быть g-carboxylated включают Glu 7, Glu 8, Glu 17, Glu 21, Glu 27, Glu 30, и Glu 33; пациенты с этими мутациями имеют умеренный к серьезной гемофилии, подчеркивая функциональную важность этих остатков. MLID93324412 69 маленькая петля, сформированная цистеином в остатках 18 и 23, является обычной к всему витамину белки свертывания крови K-зависимых. Точковые мутации в Cys 18 или Cys 23 результат в серьезной гемофилии.

Эпидермальный фактор роста подобные Области

G-carboxyglutamic кислотная область связана с двумя смежными EGF областями короткой областью, богатой в ароматических аминокислотах. EGF области, каждый характеризованный долей 53 аминокислот и образца остатков цистеина disulfide-хранящийся на таможенных складах, имеют отличные функции. Структура первой EGF области была определена перекрестной спектроскопией ядерного магнитного резонанса. MLID91308127 70 первая EGF область может функционировать как распорная деталь, начиная с фактора IX, в котором первая EGF область заменяет на передачу EGF область фактора X, имеет полную функциональную деятельность. MLID90094389 71,72 Однако, Astermark и другие., MLID92147679 73 использующих подавляющих пептида, говорили, что первая EGF область может участвовать во взаимодействии между фактором X и фактором IXa в tenase комплексе. Фактор IX Штат Алабама, который следует из точковой мутации в первой EGF области (Asp 47 B Gly), 74 мая быть дефектным в его способности связать с поверхностями ячейки. 75 Однако, потому что g-carboxyglutamic кислотная область неповреждена, этот мутант, связывает обычно с пузырьками фосфолипида. MLID86131633 76 Более современных свидетельства(очевидности) говорит, что активация фактора X фактором IXa Штат Алабама не увеличена фактором VIIIa. MLID90285142 77 Естественно встречающихся мутаций в Gln 50, Cys 51, Cys 56, и Gly 60 свинца к серьезному фенотипу гемофилии, но основанию для этой дефектной функции IX фактора не известен. Первая EGF область содержит необычную аминокислоту, b-hydroxyaspartic кислота, в остатке 64. MLID83308813 78 функция b-hydroxyaspartic кислоты неизвестна. Фактор Мутанта IX, в котором Asp 64 был видоизменен к лизину, valine, или аминоуксусной кислоте, не имеет функциональной деятельности. MLID88328994 79 естественно встречающийся мутант, фактор IX Лондон -6 (Asp 64 B Gly), кончается умеренной гемофилией B. MLID89305505 80 Однако, фактор рекомбинанта с  диким типом IX был выражен в присутствии dipyridyl, o-фенантролина, или пиридина 2,4-dicarboxylate, которые являются ингибиторами 2-ketoglutarate-dependent dioxygenases. MLID89214061 81 фактор IX выраженный в этой системе - полностью g-carboxylated, но содержит < 0.1 моля b-гидроксилирующегося аспарагинового acid/mol фактора IX, по сравнению с 0.5 молем в факторе IX выраженный в отсутствии ингибиторов. Фактор IX, который не b-гидроксилир, демонстрирует, полная функциональная деятельность когда оценено в коагулянте испытывает, и неразличим от плазменно - производного фактора IX в эндотелиальном обязательном по ячейке пробирном анализе.

В  секунду EGF область требуется для взаимодействия между фактором IXa и фактором VIIIa в tenase комплексе. MLID90094389 71,72 казалось бы, что в этой секунде EGF область содержит остатки контакта, которые взаимодействуют с фактором VIIIa, но не непосредственно с фактором подложки X. Некоторые точковые мутации в пределах этой области имеют только умеренный эффект на функцию. Однако, умеренный к серьезной гемофилии связан с мутациями Asn 92, Gly 93, Arg 94, Gly 114, Cys 124, Asn 92, Cys 95, Cys 99, Cys 111, Asn 120, и Ala 127. MLID93324412 69