Медицина \ Экспериментальная иммунология

Тетрадь для лабораторных работ по спецкурсу "Экспериментальная иммунология", страница 6

лунки стрипа или платы

по 50 мкл изотонического раствора NaCl (или ЗФР) в каждую лунку

контроль эритроцитов

50 мкл тест-

сыворотки®

50 мкл

по 50 мкл 1 % суспензии эритроцитов

инкубация до формирования агглютинации

регистрация результатов с определением титра антител

Учет реакции агглютинации проводится полуколичественно по формированию агглютинатов:

++++ - все эритроциты агглютинированы, они образуют плотный осадок, с ниеровным фестончатыми краями - "зонтик", такой результат характерен для 100 % связывания антиген-антитело,

+++ - 75 % эритроцитов агглютинированы, осадок менее прочный, чем в предыдущем случае, есть незначительная дымка свободных эритроцитов,

++ - 50 % -связывание эритроцитов, края осадка неровные, но и не фестончатые,

+ - реакция сомнительная

- - реакция отрицательная, эритроциты образуют осадок "пуговку".

Титр антител определяют по последнему разведению сыворотки крови, дающему реакцию гемагглютинации на ++ .

Задания

Протокол

1. Приготовьте суспензию спленоцитов и поставьте реакцию Ерне, определите число АОК селезенки и пронормируйте его на 10⁶ ядросодержащих спленоцитов и на всю селезенку. Зарисуйте зоны гемолиза, видимые на малом увеличении микроскопа и без увеличения

2. Осуществите постановку реакции гемагглютинации, определите титр антител, зарисуйте результат

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Скачать файл