Общая методика и основные методы исследования токсико-аллергических заболеваний, страница 3

В настоящее время редко используются довольно простые, но не очень чувствительные методы - определение показателя повреждения нейтрофилов по В. А. Фрадкину, тест альтерации нейтрофилов, реакция помутнения Уанье.

В Республиканском профпатологическом центре широко используется реакция деструкции тучных клеток, основанная на свойстве комплекса антиген-антитело вызывать деструкцию тучных клеток. В качестве источника тучных клеток используется перитонеальный экссудат крыс, которым предварительно вводится интраперитонеально питательная среда. Последующий забор экссудата обеспечивает достаточное содержание тучных клеток, которые и служат индикатором взаимодействия антител, содержащихся в сыворотке больного, и виновных антигенов. Ряду обследованных нами больных поставлена реакция деструкции тучных клеток с целью выявления этиологических факторов профессиональной аллергии.

Таким образом, в качестве методов аллергологического обследования больных с целью выявления сенсибилизации к лекарствам нами использованы реакция агломерации лейкоцитов, реакция дегрануляции тучных клеток по Шелли, реакция специфического иммунного гемолиза и тест деструкции тучных клеток крысы.

О функции иммунной системы больных судили по состоянию Т- и В - систем иммунитета и содержании иммунных комплексов. ВОЗ /1981 г./ предложила тесты для оценки иммунного статуса человека с учетом количественных и качественных характеристик иммунной системы.

Для обследования гуморального иммунитета предлагалось проводить определение концентрации иммуноглобулинов, величины циркулирующих иммунных комплексов после естественной или искусственной иммунизации, стимуляции биосинтеза иммуноглобулинов В-лимфоцитами in vitro; исследование бласт-трансформации В-лимфоцитов на специфические митогены, определение аутоантител и количественные тесты на содержание В-лимфоцитов в крови.

Для исследования клеточного иммунитета предлагались количественные и функциональные тесты определения в крови Т-лимфоцитов и их субпопуляций - хелперов, супрессоров и киллеров, кожные пробы на гиперчувствительность замедленного типа; изучение бласт-трансформации Т-лимфоцитов с помощью специфических митогенов, определение растворимых медиаторов лимфоцитов и цитотоксической активности лимфоцитов.

Исследование неспецифических факторов защиты предполагало определение активности комплемента и концентрации его компонентов, фагоцитарной активности нейтрофилов, моноцитов, хемотаксического фактора, фактора, угнетающего миграцию макрофагов, нейтрофилов, определение различных ферментов моноцитов-макрофагов, нейтрофилов.

Петровым Р. В. предложено разделить иммунологические обследования на два уровня в соответствии с их практической значимостью. К первому уровню иммунологического обследования отнесены менее трудоёмкие методы, не требующие затрат на дефицитные реактивы и позволяющие получить результаты в течение двух суток /определение относительного и абсолютного числа лимфоцитов: Т- и В-лимфоцитов; концентрации иммуноглобулинов трех классов; определение общей гемолитической активности комплемента С50, фагоцитарной активности нейтрофилов и других/.

Ко второму уровню специального характера отнесены определение субпопуляций Т-лимфоцитов, функциональной активности регуляторных клеток; реакции лимфопролиферативного ответа на митогены, определение компонентов комплемента и стадий фагоцитоза и другие. Эти тесты из-за трудоемкости и дороговизны выполнения мало доступны практическим учреждениям.

В связи с этим, в нашей работе преимущественно использованы иммунологические тесты I уровня. О состоянии клеточного иммунитета судили по общему содержанию Т-лимфоцитов в периферической крови и содержанию их субпопуляций - обладающих хелперной и супрессорной активностью.