Жидкости тела
Перитонеальную, плевральную и синовиальную жидкости собирают при пункции или из дренажных систем в стерильный контейнер с гепарином в разведении 1:1000. Количество гепарина варьирует в соответствии с объемом патологического материала (примерно 1 мл гепарина на 10 мл жидкости). Абдоминальную жидкость у пациента на продолжительном перитонеальном диализе собирают в стерильный контейнер без гепарина или прямо засевают в аэробную кровяную культуру.
Мокрота
Материал собирают утром натощак в стерильную емкость после чистки зубов и полоскания полости рта слабым раствором перманганата калия. Отделение мокроты можно индуцировать введением физиологического раствора в бронхиальное дерево с помощью аэрозольного ингалятора, применением отхаркивающих средств и физиотерапией.
Мокрота является информативным материалом для диагностики пнев-момикозов, при этом необходимо проводить подсчет выросших колоний Candida spp., т.к. в небольшом количестве они присутствуют в мокроте в норме.
Бронхосмыв
Бронхиальный секрет наиболее тщательно отражает флору легких. Материал собирают при проведении бронхоскопии, помещают в стерильную пробирку и направляют в лабораторию.
Оппортунистические патогены иногда колонизируют в легких, не вызывая заболевание, но чаще, обнаружение грибов сочетается с клиническими симптомами микозов легких и может означать их инвазию в стенку бронха.
Ткани (биопсия и аутопсия')
Образцы ткани для патогистологического и культурального исследований получают при операциях и вскрытии умерших, направляют в лабораторию в стерильном физиологическом растворе для посева и в 10-20% растворе нейтрального формалина для гистологии.
Моча
Собирают среднюю порцию мочи в количестве 25-30 мл после тщательного туалета наружных половых органов при мочеиспускании или через мочевой катетер. Материал сразу направляют в лабораторию для исследования, т.к. длительное хранение приводит к увеличению первоначально имеющихся дрожжеподобных клеток и, соответственно, к недостоверным результатам.
Фекалии
Собирают последнюю порцию кала в стерильную емкость в небольшом количестве.
2. ОБРАБОТКА БИОМАТЕРИАЛА
Предварительная подготовка материала к исследованию способствует повышению процента выявления даже единичных клеток грибов в биосубстрате и обеспечивает количественный учет культуральных посевов. Обработка образцов должна проходить в асептических условиях, чтобы избежать контаминации грибами из окружающей среды.
Концентрация микроорганизмов
Некоторые материалы, например ликвор, мочу или аспираты, необходимо концентрировать для достижения оптимального выявления возбудителей. Этого достигают путем отстаивания жидких биосубстратов до выпадения осадков, центрифугированием или фильтрацией.
Центрифугирование
Материал переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют при 1 500 об/мин в течение 5-10 мин. Надосадочную жидкость сливают, а осадок разводят стерильным физиологическим раствором в количестве 0,1-0,25 мл.
Фильтрация
Материал, в том числе и кровь, фильтруют через мембранный фильтр с порами размером 0,45 мкм. Часть отфильтрованного биосубстрата мик-роскопируют, а фильтр помещают на питательную среду.
Разжижение и гомогенизация образцов
Мокрота
Мокроту смешивают в равных объемах с муколитиками - 0,5% панкреатином или 0,5% М-ацетил-1-цистином и оставляют при комнатной температуре в течение 2 часов до разжижения материала. Можно гомогенизировать мокроту путем встряхивания со стерильными стеклянными бусами в физиологическом растворе.
Фекалии
Водянистый материал предварительно не обрабатывают. Более плотные образцы гомогенизируют стерильной дистиллированной водой или физиологическим раствором в разведении 1:10.
Ткани
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.