NЛ, излученных веществом, к числу NП поглощенных квантов:
.
(3)
Вышеприведенные соотношения называются законами С. И. Вавилова. В некоторых случаях величина выхода люминесценции может быть большой; например, для флуоресцина он равен 0,76. В большинстве случаев выход люминесценции значительно меньше единицы.
Флуоресценция и фосфоресценция.
Флуоресценция
и фосфоресценция различаются природой квантовых переходов. В структуре энергетических
уровней молекулы параллельно существуют две системы уровней: синглентные и
триплетные (рис. 1.6.). Эти уровни различаются мультиплетностью.
Мультиплетность рассчитывается как величина 2S+1, где S – спиновое квантовое число, спин электрона равен ±. Мультиплетность
синглетных уровней равна 1. Два электрона на этих уровнях характеризуются
противоположно направленными спинами: 2 (+
-
)+1=1. Мультиплетность триплетных уровней
равна 3. Два электрона на этих уровнях характеризуются сонаправленными
спинами: 2 (+
+
)+1=3.
Основной уровень молекулы является синглетным, а возбужденные уровни могут быть
и синглетными, и триплетными. Флуоресценция соответствует квантовым переходам с
возбужденных синглетных уровней на основной синглетный уровень, а
фосфоресценция – с возбужденных триплетных уровней на основной синглетный.
Вероятность переходов между уровнями с различной мультиплетностью (последний
случай) очень мала. На возбужденном триплетном уровне электрон может находиться
довольно длительное время. Такой уровень называется метастабильным. И поэтому
длительность фосфоресценции велика (более 10-3 с), по сравнению с
длительностью флуоресценции (@10-8
с).
Рис.6. Системы синглетных и триплетных энергетических уровней молекулы.
5. Люминесцентный анализ. Люминесцентные метки и зонды. Медицинское применение люминесцентных методов
исследования.
Фотолюминесценция наблюдается у многих жидких и твердых тел как неорганической, так и органической природы, особенно под действием ультрафиолетового излучения.
Определение природы и состава вещества по спектру его люминесцентного излучения, называется люминесцентным анализом. Люминесцентный анализ позволяет обнаруживать вещества в количестве до 10-10 г. Люминесцентный анализ используют для обнаружения начальной стадии порчи продуктов питания, сортировки фармакологических препаратов и диагностики некоторых заболеваний. Под действием ультрафиолетового излучения флуоресцируют многие ткани организма (ногти, зубы, непигментированные волосы, роговая оболочка, хрусталик глаза и другие). В некоторых случаях по характеру свечения можно отличить патологически измененные ткани. Характерное свечение дают бактериальные и грибковые колонии. В связи с этим люминесцентный анализ применяется при диагностике многих заболеваний, особенно в области дерматологии.
При люминесцентной микроскопии исследуются естественные препараты, имеющие собственную флуоресценцию или окрашенные флуоресцирующими красками. Источником света являются ртутные лампы высокого и сверхвысокого давления и применяются два светофильтра, один из которых расположен перед конденсором и выделяет область спектра источника света, которая вызывает люминесценцию объекта; другой находящийся после объектива, выделяет свет люминесценции. Оптика микроскопа может быть обычной, так как через нее проходит уже видимый свет, возникший на препарате в результате флуоресценции.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.