Лейкозы и миелодиспластические синдромы, страница 3

4 – выраженная спленомегалия не наблюдается при ОЛ,  но типична для ХЛ.

Методы диагностики

Диагностика лейкозов основана на распознавании лейкозных клеток и определении их происхождения (линии).

Морфологическое исследование включает цитологический и гистологический методы. Цитологическая диагностика является ведущей благодаря возможности изучения отдельных клеток и проведения ряда цитохимических реакций, установлению кариотипа, иммунофенотипированию. Она включает исследование мазков периферической крови и КМ, окрашенных по Романовскому -- Гимзе, Райту, проведение цитохимических реакций.

Основные цитологические критерии диагностики ОЛ, дифференциально-диагностические признаки ОМЛ и ОЛЛ приведены в табл. 2.1.

Таблица 2.1. Цитологическая характеристика бластов

Для верификации ОЛ используют цитохимические реакции,  позволяющие идентифицировать клеточную линию (см. табл. 2.2). К наиболее информативным относятся реакции на миелопероксидазу (МПО) по методу Грехема – Кнолля (1963), на фосфолипиды (судан черный В (СЧВ) по методу Дэвиса -- Орнштейна (1959), на неспецифическую эстеразу (НСЭ) по методу Леффлера (1961). Реакция на хлорацетатэстеразу (ХАЭ) менее специфична и применяется при диагностике некоторых форм, например при остром миеломоноцитарном лейкозе и некоторых других. Реже используется  окраска клеток на гликоген по Шабадашу (1947) (син.: ШИК-реакция).

МПО выявляется в клетках гранулоцитарной и моноцитарной линий, ее интенсивность нарастает в процессе дифференцировки клеток. Миелобласты обычно содержат единичные МПО-позитивные гранулы, напротив, сегментированные нейтрофилы окрашиваются интенсивно. В цитоплазме нормальных моноцитов выявляются лишь единичные МПО-позитивные гранулы. При остром моноцитарном лейкозе реакция монобластов и промоноцитов отсутствует или очень слабая, лишь в отдельных случаях интенсивная. Реакция на фосфолипиды в целом обычно совпадает с окраской на МПО, хотя и считается более чувствительной, но менее специфичной. Она предпочтительнее ввиду использования в реакции на МПО высокотоксичных реактивов, большей сохранности препаратов, возможности окрашивать цитологические препараты более чем через 5 дней.

Реакция на НСЭ с использованием в качестве субстрата a-нафтилбутирата, a-нафтилацетата с ингибированием фторидом натрия избирательно выявляет моноцитарный компонент, ее применяют в дифференциальной диагностике некоторых форм ОМЛ.

В отличие от МПО, ХАЭ весьма стабильна, может выявляться в старых цитологических мазках, а также, что весьма важно, после фиксации и гистологической обработки в биоптатах КМ (окраска по Ледеру).

ШИК-реакция, выявление кислой фосфатазы (КФ) из-за отсутствия линейной и нозологической специфичности в настоящее время применяется ограниченно. Так, авторы общепринятой Франко-Американо-Британской (ФАБ) классификации ОЛ не придают ей особого значения и даже считают излишней, так как она действительно не позволяет идентифицировать определенную клеточную линию.

Тем не менее окраска на гликоген выявляет крупнокапельное или глыбчатое маргинальное его накопление  в гранулоцитах и эозинофилах, моноцитах и недифференцированных клетках, что может встречаться при лейкозах. ШИК-позитивное окрашивание эритроцитов и эритробластов наблюдается при ряде патологических процессов: железодефицитной анемии, талассемии, эритремии, ОМЛ. При ОЛЛ реакция на гликоген в гранулярной форме положительна.